苹果属植物叶片类黄酮的含量及多样性研究

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类黄酮是从维管植物中分离的一大类多酚物质的总称,具有抗菌、抗氧化等多种生理功能,现已知包括8000多种化合物,包括黄酮醇、花色苷等8大类,其中,黄酮、黄酮醇和花色苷较常见。苹果中含有丰富的类黄酮,以二氢查耳酮、黄酮醇为主。本文从苹果组、山荆子组、花楸苹果组、多胜海棠组、绿苹果组、栽培种和杂交种中选取25个野生种,从欧亚苹果组的七个品种群以及引进品种中选取21个栽培品种,对我国苹果属植物叶片中类黄酮的含量及多样性进行研究。研究方法:通过正交实验、单因素实验确定类黄酮的最佳提取条件;对液相色谱检测条件进行优化,测定槲皮素-芸香糖苷(芦丁)、槲皮素-半乳糖苷、槲皮素-葡萄糖苷、槲皮素-阿拉伯糖苷、槲皮素-鼠李糖苷和根皮苷等6种类黄酮。根据紫外-可见吸收光谱对不确定物质进行定性;对样品间6种类黄酮的含量进行差异显著性分析;利用香农、辛普森等主要多样性指数衡量其类黄酮组成的多样性;以类黄酮为指标进行聚类分析,并探讨其植物学分类的一致性。本文得出的主要研究结论如下:1、从提取率、准确度和重复性综合考虑,最佳提取条件是:料液比为1:50,室温下用50%的乙醇超声提取三次,每次提取1h。优化后的液相检测条件为:在350nm(槲皮苷)和280nnm(根皮苷)检测波长下,用洗脱程序15%B~20%B(20min)、20%B~30%B (5min)、30%B~100%B(5min)在30min内能将6种类黄酮洗脱出来;流动相组成是6%乙酸水溶液(A)和乙腈(B)。2、定性结果表明,黄酮醇和二氢查耳酮的种类极为丰富。上述6种类黄酮和另外一种黄酮醇在全部样品中都存在,属于共有类黄酮。一种黄烷醇和两种二氢查耳酮是野生种的特有类黄酮。晚熟栽培品种的类黄酮种类一般比早、中熟品种更丰富。栽培种的类黄酮种类分布相对更均匀一致。与苹果红色果皮相比较,叶片中不含花青苷类。3、定量结果发现,不同组系的品种间类黄酮含量有显著差异,且类黄酮总量在组、系间的分布没有明显规律。与栽培品种相比较,6种类黄酮的含量在野生种间的分布更均匀一致。大多数栽培品种6种类黄酮的含量和总量都高于野生种。根皮苷存在所有样品中,且在所有品种中含量都最高(高达43.542mg/g)。在全部样品中,6种类黄酮含量从高到低依次是根皮苷、槲皮素-鼠李糖苷、槲皮素-阿拉伯糖苷、槲皮素-半乳糖苷、槲皮素-葡萄糖苷和芦丁4、方差分析和多样性指数表明,这6种类黄酮的含量在品种间差异显著。香农和辛普森多样性指数值表明野生种和栽培品种的类黄酮多样性水平基本一致。但是,聚类分析结果与品种群、组或系的植物学分类没有明显联系。除以上结论外,关于苹果叶片中类黄酮含量的季节性与地域性变化,以及其与相同品种的果实、果皮之间类黄酮种类和含量的差异与联系等问题还需要做深入研究。
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