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酸浆是茄科酸浆属的一年生或多年生草本植物,具有丰富的活性物质。酸浆有许多药用特性,包括抗炎、抗癌、利尿等。目前,酸浆属浆果免疫调节作用鲜有报道。本文以毛酸浆果实、黄果酸浆果实、紫果酸浆果实为研究对象,用50%乙醇提取,得到三种浆果提取物,分别为毛酸浆果提取物(fruit extracts of Physalis pubescens L.,FEPU)、黄果酸浆提取物(fruit extracts of Physalis peruviana L.,FEPE)和紫果酸浆提取物(fruit extracts of Physalis pixocarpa L.,FEPI)。通过体外研究酸浆属三种浆果提取物(FEPU,FEPE,FEPI)对巨噬细胞RAW264.7增殖、细胞介质含量、细胞因子分泌及其m RNA表达、吞噬能力、细胞周期以及细胞凋亡的影响,探讨酸浆属三种浆果提取物对巨噬细胞RAW264.7免的疫调节作用。通过体外研究毛酸浆果提取物(FEPU)对Th1细胞增殖、细胞介质含量、细胞因子分泌及其m RNA表达、细胞周期以及凋亡的影响,探讨毛酸浆果提取物对Th1细胞的免疫调节作用。通过体外研究毛酸浆黄酮提取物(fruit flavonoids extract of Physalis pubescens L.,FFEPU)对RAW264.7细胞增殖、细胞介质含量、细胞因子分泌的影响,探讨毛酸浆黄酮提取物对巨噬细胞RAW264.7的免疫调节作用。噻唑蓝比色法(MTT)确定RAW264.7细胞增殖活性、CCK-8法确定Th1细胞增殖活性,格里斯法(Griess)、酶联免疫法(ELISA)、中性红吞噬实验、荧光探针法测定体外培养的RAW264.7中一氧化氮(NO)、白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)、吞噬率以及活性氧(ROS)含量;流式细胞术测定细胞周期变化及细胞凋亡情况,荧光定量反转录-聚合酶链反应(q RT-PCR)检测IL-2、IL-6、TNF-α以及IFN-γ细胞因子m RNA表达水平。结果如下:(1)酸浆属三种浆果提取物对RAW264.7免疫活性的影响。与空白组、黄果酸浆提取物组和紫果酸浆提取物组相比,毛酸浆果提取物质量浓度为25μg/m L时免疫增强效果最佳,差异显著(p<0.05),其细胞增殖率、NO生成量、IL-6、TNF-α和IFN-γ的分泌量、吞噬率、相对活性氧水平分别为130.53±10.42%、27.79±0.45μmol/L、15.41±0.11 pg/m L、150.54±0.42 pg/m L、118.02±0.38 pg/m L、189.88±7.30%、137.75±0.40%。RAW264.7细胞周期的G0/G1期、S期、G2/M期百分比分别为53.08±0.75%、29.52±0.67%和17.40±0.63%。RAW264.7细胞凋亡率为16.50±1.29%,与空白组相比,降低52.78%。IL-6、TNF-α和IFN-γm RNA相对表达量分别为11.39±0.98、26.17±0.18、24.70±1.94。(2)毛酸浆果提取物对Th1细胞免疫活性的影响。与空白组相比,毛酸浆果提取物质量浓度为500μg/m L时免疫增强效果最佳,其细胞增殖率、NO生成量、IL-2、TNF-α和IFN-γ的分泌量、相对活性氧水平分别为147.98±2.05%、9.55±0.55μmol/L、73.83±2.89 pg/m L、91.65±0.24 pg/m L、119.13±4.16 pg/m L、236.50±0.87%。Th1细胞周期的G0/G1期、S期、G2/M期百分比分别为65.38±0.15%、21.49±0.60%、13.13±0.46%。Th1细胞凋亡率为15.46±0.06%,与空白组相比,降低44.65%。IL-2、TNF-α和IFN-γm RNA相对表达量分别为10.13±0.21、21.26±0.39、19.66±0.61。(3)毛酸浆果黄酮提取物对RAW264.7免疫活性的影响。运用UHPLC-Q-TOF-MS测定毛酸浆果黄酮提取物组成分析,鉴定出14种黄酮类物质。毛酸浆果提取物的黄酮含量为2.81±0.01 mg/g,毛酸浆果黄酮提取物的黄酮含量为2.97±0.01 mg/g。毛酸浆果黄酮提取物质量浓度为23.65μg/m L时免疫增强效果最佳,其细胞增殖率、NO生成量、IL-6、TNF-α和IFN-γ的分泌量分别为138.25±0.90%、29.73±0.17μmol/L、16.75±0.04pg/m L、160.26±0.24 pg/m L、121.13±0.39 pg/m L。与毛酸浆果提取物组相比,NO生成量提高6.98%,IL-6、TNF-α和IFN-γ的分泌量分别提高8.70%、6.46%、2.64%。