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目的:基于对公共数据库生物信息学分析结果及高内涵筛选结果,明确候选基因ABLIM2在人胃癌及癌旁组织的表达差异;统计学分析ABLIM2表达水平与胃癌临床病理特征之间的联系;同时通过细胞实验明确ABLIM2基因在胃癌发生发展中发挥的生物学功能及其机制。方法:1.检索TCGA数据库,通过生物信息学分析方法及高内涵细胞成像筛选,获得候选基因-ABLIM2。收集90例行胃癌根治术并经病理诊断为胃腺癌的患者之石蜡组织标本,通过免疫组化实验检测胃癌与癌旁组织的ABLIM2的表达情况,同时统计分析ABLIM2表达水平与临床病理特征(年龄、性别、肿瘤直径、肿瘤分化程度、临床分期、浸润深度和淋巴结转移)之间的联系。通过实时定量PCR(q PCR)检测ABLIM2基因在4种人胃癌细胞株MKN45、MKN74、MGC803和BGC823中的表达情况。2.根据ABLIM2基因在4种人胃癌细胞株中的表达情况,选取高表达ABLIM2的细胞系BGC823,采用脂质体转染的方法,转染表达ABLIM2 sh RNA的质粒,构建稳定敲减ABLIM2细胞系。选取低表达ABLIM2的细胞系MKN45,对其进行脂质体介导ABLIM2过表达。通过q PCR和Western blot分别检测ABLIM2 m RNA表达水平和蛋白表达水平,以分别确定ABLIM2的敲减、过表达效率。3.应用实时细胞功能分析仪(Incucyte)监测并分析敲减ABLIM2的BGC823细胞系(sh ABLIM2)及其对照组(sh Ctrl)、过表达ABLIM2的MKN45细胞系(OE-ABLIM2)及其对照组(OE-Ctrl)各组细胞的细胞增殖、侵袭和迁移能力。应用平板克隆形成实验检测sh Ctrl和sh ABLIM2两组细胞的克隆形成能力,应用软琼脂克隆形成实验检测OE-Ctrl和OE-ABLIM2两组细胞的克隆形成能力,从而确定敲减及过表达ABLIM2对胃癌细胞表型的影响。4.应用流式细胞分析仪检测并分析BGC823 sh Ctrl和sh ABLIM2两组细胞的细胞周期和细胞凋亡,确定敲减ABLIM2对胃癌细胞功能的影响。结果:1.经对TCGA数据库数据分析,据分析结果,分别敲减候选基因、通过高内涵细胞成像观察细胞生长情况,初步证实ABLIM2与胃癌细胞生长的关系。免疫组化实验结果表明,ABLIM2在胃癌组织中表达阳性率明显高于癌旁组织(p<0.001)。在人胃癌细胞株BGC823、MKN45、MKN74和MGC803中,ABLIM2基因在BGC823中表达量最高,在MKN45细胞系中表达量最低。在临床病理特征分析中,ABLIM2表达与肿瘤分化程度、临床分期和淋巴结转移相关:低分化、III+IV期或出现淋巴结转移的胃癌组织中的ABLIM2蛋白表达阳性率较对照组高,具有统计学差异(p<0.05)。但ABLIM2蛋白表达与性别、年龄、肿瘤直径、浸润深度无关(p>0.05)。2.成功构建了稳定敲减ABLIM2基因的BGC823细胞系,q PCR实验及Western Blot实验显示敲减效率达50%,与对照组相比,差异具有统计学意义(p<0.001)。3.Incucyte分析结果显示:对比sh Ctrl组,sh ABLIM2组的细胞增殖、细胞侵袭、细胞迁移和克隆形成能力均明显减弱(p<0.05)。反之,对比OE-Ctrl组,OE-ABLIM2组的细胞增殖、细胞侵袭、细胞迁移和克隆形成能力均显著增强(p<0.01)。4.流式分析结果显示:在细胞周期中,sh ABLIM2组的S期细胞比例明显少于sh Ctrl组,差异具有统计学意义(p<0.001);同时,G1期细胞比例略有增加,但两组间比较差异无统计学意义(p>0.05)。在细胞凋亡分析中,对比sh Ctrl组,sh ABLIM2组的早期和晚期的细胞凋亡数量均有明显升高,差异具有统计学意义(p<0.01)。结论:ABLIM2在胃腺癌患者的胃癌组织中呈高表达,且表达量与肿瘤分化程度、临床分期和淋巴结转移相关。ABLIM2基因具有促癌特性,促进着胃癌的发生发展。因此,ABLIM2可能是胃癌的潜在的治疗靶点。