农药在中国农业发展中发挥着及其重要的作用,但农药的不合理使用导致农药残留日益突出。因此研制出简便、经济、快速的农药残留检测技术是我国的当务之急。本研究对雪豆和花芸豆酯酶进行分离纯化,并研究两种植物酯酶的酶学特性,最后测定两种植物酯酶对23种农药的敏感性。研究结果如下:1.雪豆和花芸豆酯酶最适反应浓度分别为0.33μg/mL和0.45μg/mL,最佳反应温度为40℃,最适反应pH为6.5,乙酸-1-萘酯为最适底物,对毒扁豆碱和双(4-硝基苯基)磷酸酯敏感性较高,米氏常数Km值分别为0.085mmol/L和0.119mmol/L。2.选用离子交换和凝胶过滤纯化技术对两种植物酯酶进行纯化,雪豆和花芸豆酯酶的比酶活分别提高了56倍和41倍,酶活回收率分别为45.75%和41.53%。3.采取凝胶电泳SDS-PAGE对雪豆和花芸豆纯化酶进行分析和分子量的确定,得出比较明显的蛋白条带,得到雪豆和花芸豆酯酶的相对分子量约为26kDa。4.在16种有机磷农药中,雪豆酯酶对农药敌敌畏、久效磷、辛硫磷、敌百虫、三唑磷、丙溴磷、甲胺磷、毒死蜱、乐果、氧乐果相对较敏感,对农药马拉硫磷、乙酰甲胺磷、杀螟硫磷、莎蜱磷、草铵磷敏感性相对较低,而对杀扑磷则不敏感。在7种氨基甲酸酯类农药中,雪豆酯酶对农药灭多威、克百威、残杀威、涕灭威相对较敏感,对农药抗牙威、杀虫单、丁硫克百威的敏感性则相对较低。5.雪豆酯酶在经过纯化后整体上对8种有机磷农药的敏感性略有提高,IC50值在10-6~10-8mol/L范围内。雪豆酯酶纯化前后对敌百虫、毒死蜱、氧乐果的敏感性提高了约2倍,对久效磷的敏感性提高了约4倍,对辛硫磷、三唑磷、乐果、敌百虫的敏感性基本未提高。4种氨基甲酸酯类农药残杀威、灭多威、涕灭威、克百威对雪豆酯酶纯化前后的半抑制浓度IC50值在10-6~10-7mol/mL范围内。经过纯化得到的雪豆酯酶,使得酶对氨基甲酸酯类农药敏感性基本有所提高,对克百威的敏感性提高了约4倍,对涕灭威的敏感性提高了约3倍,对灭多威的敏感性提高了约2倍,对残杀威的敏感性基本未提高。6.在16种有机磷农药中,花芸豆酯酶对农药敌敌畏、久效磷、辛硫磷、敌百虫、三唑磷、丙溴磷、甲胺磷、毒死蜱、氧乐果、杀螟硫磷、乙酰甲胺磷相对较敏感,对农药马拉硫磷、乐果、莎蜱磷、感性相对较低,而对草铵磷、杀扑磷则不敏感。在7种氨基甲酸酯类农药中,花芸豆酯酶对农药灭多威、克百威、残杀威、涕灭威相对较敏感,对农药抗牙威、丁硫克百威的敏感性则相对较低,而对杀虫单则不敏感。7.8种有机磷农药对花芸豆酯酶纯化前后半抑制浓度IC50值在10-6~10-8mol/L范围内。经过纯化得到的花芸豆酯酶,敏感性略有提高。花芸豆纯化酶敌敌畏、久效磷、辛硫磷、氧乐果的敏感性提高了约2倍,对三唑磷、毒死蜱、乐果、敌百虫敏感性变化比较小。4种氨基甲酸酯类农药残杀威、灭多威、涕灭威、克百威对花芸豆酯酶纯化前后半抑制浓度IC50值都在10-6~10-8mol/L范围内。经过纯化得到的花芸豆酯酶,使得酶对氨基甲酸酯类农药敏感性略有提高,对残杀威的敏感性提高了约4倍,对涕灭威的敏感性提高了约2倍,对灭多威、克百威的变化比较小。8.雪豆和花芸豆酯酶对多种常用农药具有很好的敏感性,其敏感性相对于目前酶抑制法常用的酶有所提高,并且具有价格便宜、提取简单、检测方便等优势,雪豆和花芸豆酯酶在农药残留检测方面具有相当广阔的前景。