长链非编码RNA-PVT1在结直肠癌组织中的表达及意义

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目的大肠癌是严重威胁我国人民健康的恶性肿瘤之一。研究表明长链非编码RNA在肿瘤的发生发展中发挥重要作用,关于非编码RNA在结直肠癌中的研究已成为当前的热点。长链非编码RNA-PVT1位于染色体8q24.21,是一个与肿瘤高度相关的区域,研究发现沉默Pvt1促进了细胞凋亡,且在结直肠癌细胞中Pvt1的表达水平是升高的。因此检测结直肠癌组织长链非编码RNA-PVT1的表达水平,分析比较PVT1表达水平与癌组织分化程度、病理分期的关系,为寻找新的结直肠癌标记物和治疗靶点提供实验基础。方法第一部分实验:收集大肠癌病人的临床标本,分为癌组织及癌旁组织,提取相应组织的总RNA,取5ul总RNA提取液,使用逆转录试剂盒进行逆转录反应,合成双链互补c DNA;用SYBR?Green Realtime PCR Master Mix试剂盒对PVT-1的转录水平进行检测。第二部分实验:琼脂糖凝胶电泳取5μl RT-PCR扩增产物,1μl 6×loading buffer混合上样,120V电压电泳20 min,用Baygene BG-gds Auto520凝胶成像系统分析仪紫外光检测照相。结果第一部分:76份病例标本中癌组织中PVT1表达水平是癌旁组织的3.1倍。低分化组与中分化组癌组织中目的基因表达水平有统计学差异,低分化组高于中分化组(P<0.05)。“III期、IV期”组癌组织中PVT-1表达水平明显高于“0期、I期、II期”组(P<0.01)。II期组患者癌组织中PVT-1表达水平明显高于I期,III期组癌组织中PVT-1表达水平明显高于II期,差异皆有统计学意义(P<0.01)。PVT1表达水平与性别、年龄无关。第二部分:凝胶电泳试验证实癌组织中的c DNA含量高于癌旁组织。结论1.癌组织中Pvt1的表达水平高于癌旁组织;2.癌组织中Pvt1的表达水平与组织分化类型呈负相关;3.Pvt1的表达水平与病理分期相关,分期越晚表达水平越高。
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