【摘 要】
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该文采用6﹪HES、3﹪Gel三次沉降脐血细胞,其中白细细胞和CPU收率分别达到86﹪和92﹪95﹪和95﹪;之后再用1.077g/mL Ficoll密度梯度离心分离,使得所得分离液中白细胞比例达到93﹪,CPU回收率
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该文采用6﹪HES、3﹪Gel三次沉降脐血细胞,其中白细细胞和CPU收率分别达到86﹪和92﹪95﹪和95﹪;之后再用1.077g/mL Ficoll密度梯度离心分离,使得所得分离液中白细胞比例达到93﹪,CPU回收率保持在84﹪,总细胞和CFU扩增效果分别是采用一步1.077g/mL Ficoll分离方法的2.44和3.09倍.分离时发现沉降次数和分离液添加量是提高分离效果的关键.造血细胞冻存采用10﹪DMSO+3﹪Albumin+5﹪Dextran40+20﹪FCS+IMDM的冷冻保护剂组合、0.8升甲醇浴控制降温速率、从4℃→-30℃→-50℃→气态液氮→-197℃液氮的多步降温冻存方法;同时采用37℃水浴,3﹪Albumin+5﹪Dextran 40+IMDM溶液(1:1)稀释细胞液,离心去除DMSO的细胞复苏方法,结果总细胞、白细胞和CFU收率分别达到76.4﹪、84.2﹪和79.5﹪,造血干/祖细胞扩增能力保持.实验证明:以上脐血造血细胞建库和体外扩增的需要.
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