论文部分内容阅读
目的:观察橄榄苦苷（OL）对2型糖尿病胰岛素抵抗的作用，探讨其作用机制。 方法:采用随机对照的实验方法，动物实验选取自发性2型糖尿病动物模型 db/db小鼠12只，适应性喂养1周，不同次随机血糖≥11.1 mmol/L纳入实验。按体重、随机血糖随机分为：模型组、橄榄苦苷组（OL组）6只；另设6只同周龄正常C57BL/6J小鼠为正常组，连续干预4周。实验过程中观察记录小鼠一般情况、体重、空腹血糖，第4周分别进行OGTT、ITT实验；4周后小鼠麻醉、取血，分别冻存和固定肝脏，检测血清中IR相关指标FBG、Fins和HOMA-IR，血脂指标TG、TC和FFA，行HE染色观察肝脏病理形态变化；Western blot和Real time-PCR检测InsR、IRS1、GLUT2的基因和蛋白表达。细胞实验采用 HepG2肝细胞，常规复苏、培养，胰岛素浓度为10-6mol/L的培养基诱导36 h建立肝细胞胰岛素抵抗模型，分为正常组、模型组、OL组。进行干预后Western blot和Real time-PCR检测胰岛素信号通路InsR、IRS1、GLUT2的基因和蛋白表达，验证动物实验结果。 结果:药物干预4周后，与正常组小鼠比较，模型组小鼠血清FBG、Fins和HOMA-IR明显升高，OGTT、ITT试验峰值延后， TG、TC和FFA显著升高；与模型组比较，OL组显著降低小鼠FBG、Fins、HOMA-IR、TG、TC和FFA。HE染色显示OL组肝细胞较模型组排列整齐、脂肪样变性减轻、炎细胞浸润减少。 Western blot和 Real time-PCR检测：与正常组比较，模型组小鼠肝脏和体外胰岛素抵抗 HepG2肝细胞中InsR、IRS1、GLUT2蛋白和mRNA表达显著降低；与模型组比较，OL组小鼠肝脏和体外胰岛素抵抗HepG2肝细胞中InsR、IRS1、GLUT2蛋白和mRNA表达显著升高。 结论:OL具有改善糖尿病小鼠IR、调节糖脂代谢的作用，机制可能是OL上调肝脏胰岛素信号通路中InsR、IRS-1、GLUT-2基因、蛋白表达。