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背景:蛛网膜下腔出血(subarachnoid haemorrhage,SAH)是一种严重的脑血管疾病,不仅与首次出血和再出血的高死亡率有关,而且很大一部分患者甚至在动脉瘤成功夹闭或卷曲固定后也会出现迟发性神经功能缺损。过去的研究工作一直集中在脑血管痉挛(cerebral vasospasm,CVS)上,血管痉挛被认为是导致迟发性神经功能缺损的主要因素。然而抗血管紧张素类药物在临床试验中未能改善预后,使人们认识到早期脑损伤(early brain injury,EBI)在蛛网膜下腔出血病理过程中扮演重要角色。与蛛网膜下腔出血相关的即时事件,包括脑血流量减少和全脑缺血,会在迟发性血管痉挛发作前引发一系列的病理改变。出血早期的病理改变会导致血脑屏障破坏和细胞死亡。单纯关注血管痉挛的治疗,完全不考虑早期脑损伤,不足以治疗蛛网膜下腔出血。相反,治疗干预的目的必须是阻止早期脑损伤的分子级联反应,这可能会导致血管痉挛以外的长期预后不良。早期脑损伤在蛛网膜下腔出血的病理过程中起着很重要的作用,而内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)是导致早期脑损伤的病理生理的重要原因。牛磺熊脱氧胆酸(taursodeoxycholic acid,TUDCA)是一种亲水性胆汁酸,是一种内质网应激抑制剂和化学伴侣,具有抑制细胞凋亡和减轻炎症的作用。近年来,已经有文章指出,TUDCA在颅脑外伤(traumatic brain injury,TBI)、脑出血(intracerebral hemeorrhage,ICH)和神经退行性疾病(neurodegenerative diseases)等几种中枢神经系统疾病中起到抑制内质网应激的作用进而阻止早期脑损伤。目的:本实验旨在观察和分析内质网应激导致小鼠早期脑损伤的作用机制,以及TUDCA对蛛网膜下腔出血小鼠的保护作用,以期为TUDCA治疗蛛网膜下腔出血提供理论参考。方法:(1)实验一:用颈动脉穿刺法对C57BL/6小鼠进行蛛网膜下腔出血小鼠模型的制备。1天后处死,分离脑组织,观察SAH模型标本的大体形态以及利用HE染色观察蛛网膜下腔积血确认造模成功。(2)实验二:将C57BL/6小鼠随机分为7组:SAH 3h、SAH 6h组、SAH12h组、SAH 1Day组和SAH 3Day组、SAH 5Day组、SAH 7Day组。激光散斑检测其脑血流量;后分离脑组织提取蛋白,用Westernblotting检测GRP 78(ER应激标记物)表达水平随时间的变化趋势。(3)实验三:将C57BL/6小鼠随机分为3组,假手术组(sham组)、对照组(SAH+安慰剂组)、给药组(SAH+TUDCA组)。每组6只,造模后24小时,对实验小鼠进行神经功能评分、用激光散斑检测小鼠血管痉挛后脑血流量的变化、SAH等级评分、蛋白质印迹法(western blot)检测GRP78,p-PERK,PERK,p-eIF2α,eIF2α,ATF4等相关蛋白质表达量。(4)实验四:将C57BL/6小鼠随机分为3组,假手术组(sham组)、对照组(SAH+安慰剂组)、给药组(SAH+TUDCA组)。每组6只。造模后24小时,利用干湿重法测量脑组织含水量。(5)实验五:将C57BL/6小鼠随机分为3组,假手术组(sham组)、对照组(SAH+安慰剂组)、给药组(SAH+TUDCA组)。每组6只。造模后24小时用EB渗漏实验检测血脑屏障破坏情况。结果:小鼠蛛网膜下腔出血24h内质网应激标记物GRP78表达最高,激光散斑显示24h内蛛网膜下腔出血小鼠脑血流量持续低血流。造模24小时后,TUDCA组与对照组的小鼠相比,SAH等级评分无显著差,但神经功能评分TUDCA组要高于对照组大鼠;干湿重法的结果表明TUDCA组小鼠的脑水肿较轻;western blot结果表明TUDCA组小鼠的ERS反应和脑血流量减少都受到了抑制,同时细胞凋亡水平也受到了明显的抑制。结论:对于蛛网膜下腔出血小鼠模型,TUDCA能够在早期减轻ERS反应以增加脑表面血流量恢复,改善神经功能,抑制细胞凋亡,提供神经保护作用,PERK→eIF2α→ATF4很可能为相关机制。