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第一部分：化疗前后不同时期胶质瘤组织中ATM的表达变化和意义目的：探索化疗前后不同时期胶质瘤组织中ATM表达及变化规律，为确定分子靶向干预的最佳时机提供依据。方法：利用人胶质瘤U251细胞裸鼠皮下异位移植制作胶质瘤模型，通过顺铂对荷瘤裸鼠进行化疗(5mg／kg／d连续腹腔注射4—5天)，建立胶质瘤化疗和化疗后进展模型。利用功能分类基因芯片系统检测化疗前后不同时期胶质瘤组织中ATM的表达情况,并利用实时定量RT-PCR和免疫组织化学进行验证。结果：结果发现ATM在化疗前后不同时期表达出现明显变化，其中在化疗结束时表达显著增强，在化疗后肿瘤消退至最小时ATM表达又明显降低，然而在胶质瘤进展时其表达再次明显增强，定量RT-PCR和免疫组化结果与此相一致。结论：化疗前后不同时期胶质瘤组织中ATM的表达呈动态变化，化疗结束时和肿瘤进展期表达明显上调。第二部分：ATM基因慢病毒RNAi载体的构建目的：构建ATM基因RNAi慢病毒载体，并检测其体外抑制U251和U87胶质瘤细胞中ATM的表达效率，为后续进一步研究奠定基础。方法：设计筛选ATM基因RNAi有效靶序列，合成靶序列的oligo DNA，退火形成双链DNA，并与经AgeI和EcoRI酶切后的pGCSIL—GFP载体连接产生携带ATM基因的慢病毒载体，PCR筛选阳性克隆，测序鉴定,并和pHelper1.0、pHelper2.0载体共转染包装细胞293T细胞，产生慢病毒ATM-RNAi-LV，以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度。慢病毒ATM-RNAi-LV转染U251和U87胶质瘤细胞后，RT--PCR检测ATM的表达抑制效率。结果：PCR和测序结果证实，成功构建慢病毒了ATM基因shRNA的慢病毒载体。慢病毒ATM-RNAi-LV1和ATM-RNAi-LV2原液滴度分别为3×108TU/mL和7×108TU/mL，在体外U251和U87胶质瘤细胞中抑制ATM的表达有效率均大于70%。结论：成功构建ATM基因RNAi慢病毒载体，且在体外U251和U87胶质瘤细胞中能够显著抑制ATM的表达，可以为后续研究提供基础。