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目的：探讨转染吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine2,3-dioxygenase,IDO)基因并获得高表达的小鼠骨髓来源成熟树突状细胞(Dendritic Cell, DC)联合色氨酸代谢产物对同种异系T淋巴细胞增殖的影响,为临床预防器官移植排斥反应,成功诱导移植后免疫耐受开辟新途径。方法：(1)应用RT-PCR技术从小鼠附睾中扩增IDO基因序列,构建IDO真核表达载体pEGFP-N1-IDO质粒。(2)采用培养基细胞因子选择法体外培养小鼠骨髓来源DC,流式细胞仪检测DC表面抗原CD80、CD86、MHC Ⅱ、CDllc的表达情况。(3)利用脂质体介导法使pEGFP-N1-IDO质粒转染小鼠成熟DC,倒置荧光显微镜下观察转染后DC中绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR及免疫细胞化学法分别在mRNA和蛋白水平检测IDO的表达。(4)免疫磁珠法阳性分选同种异系小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞,流式细胞仪检测CD4+T淋巴细胞的阳性率。(5)以转染IDO基因的DC作为刺激细胞,小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞作为反应细胞行单向混合淋巴细胞培养,同时增加培养基中色氨酸产物的量,MTT法检测CD4+T淋巴细胞的增殖情况。使用SPSS17.0软件包进行数据分析。结果：(1)成功构建含小鼠IDO基因的真核表达载体pEGFP-N1-IDO质粒,并转染DC获得表达。(2)经体外培养,每只小鼠可获得5-6×106个具备典型树突状结构的骨髓来源DC,其表面高表达CD80(97.7%)、CD86(83.6%)、MHC-Ⅱ(94.6%)、CDllc(87.9%)。(3)免疫磁珠法可分选出纯度达90%以上的CD4+T细胞。(4)IDO+DC组及IDO-DC+色氨酸产物(KYN、3-HK、3-HAA)组均明显抑制CD4+T细胞增殖,而IDO+DC+色氨酸产物组较前两者对其增殖抑制更显著(P<0.001)。其中以3-HAA的作用最明显,所需浓度最低。转染IDO质粒的DC与色氨酸代谢产物对CD4+T细胞的增殖抑制具有叠加作用。结论：高表达IDO的小鼠骨髓来源成熟DC联合色氨酸代谢产物对同种异系小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞的增殖抑制能力较单一因素作用时更为显著。