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目的:结肠癌转移相关基因1(metastasis-associated in colon cancer-1,MACC1)是2009年在结肠直肠癌研究时,用全基因组测序检测发现的全新基因,后续发现在众多实体肿瘤的组织中MACC1蛋白升高,并和肿瘤的侵袭和转移机制以及肿瘤恶性转化等密切关联。目前多项研究证实血清和组织中的MACC1蛋白的升高在各种恶性肿瘤中具有一定的诊断和预后价值。目前对MACC1基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymer-phism,SNP)的研究发现,部分MACC1基因SNP位点与结直肠癌、肝细胞癌、乳腺癌等的复发转移、生存率、发病风险相关。本课题拟研究血清MACC1蛋白对胃癌的诊断预后价值及与胃癌淋巴转移、远处转移及病理分期的关系,同时采用微测序技术(也叫SNaPshot技术)检测MACC1基因的rs4721888、rs975263、rs1990172三个SNP位点的多态性,分析各位点基因型、等位基因在本研究人群中的分布频率及与胃癌发病风险的关系。为胃癌的分子基因遗传机制和发病风险等提供一定的理论根据,为进一步研究打下基础。方法:本课题中,用酶联免疫吸附(ELISA)的试验方法测定胃癌病例组147例(男115例,女32例)和健康健康对照组102例(男性65例,女性37例)的血清MACC1蛋白,并比较病例组与健康健康对照组,病例组中男性与女性、有无转移、病例组各TNM分期之间血清MACC1蛋白水平之间的关系,分析血清MACC1蛋白对胃癌诊断及预后的价值。采用SNaPshot方法,对MACC1基因的rs4721888、rs975263、rs1990172三个SNP位点进行基因型分型,分别检测病例组147例(男113例,女34例)和健康健康对照组122例(男81例,女41例),并抽取部分样品用一代测序方法验证SNaPshot方法检测的结果。用群体遗传学哈-温平衡定律(Hardy-Weinbergequilibrium,HWE)验证健康对照组样本群体代表性、可比性。校对性别以及年龄等混杂要素的影响后,采用logistic回归解析各SNP的比值比(odds ratio,OR)以及95%置信区间(Confidence interval,CI),最终分析MACC1三个SNP位点多态性与胃癌患病风险之间的关系。结果:1.病例组、健康对照组血清MACC1蛋白分别为273.71±204.28(pg/ml)、171.50±135.96(pg/ml),病例组血清MACC1蛋白比健康对照组显著增高(Z=-6.652,P=0.000,P<0.05);运用ROC曲线软件进行相关分析(AUC=0.748,95%CI=0.689~0.801),Cut-off值为228.67pg/ml时,对应的敏感性为63.27%、特异性为74.51%。2.胃癌患者在不同TNM分期之间血清MACC1蛋白比较(χ~2=42.223,P=0.000,P<0.05)。胃癌早期(Ⅰ+Ⅱ)与Ⅲ期、Ⅳ期之间比较血清MACC1蛋白依次升高(χ~2=37.428,P=0.000,P<0.05),各期之间血清MACC1蛋白的多重比较,分期越高血清MACC1蛋白越高,早期(Ⅰ+Ⅱ)与Ⅲ期(P=0.020,P<0.05),早期(Ⅰ+Ⅱ)与Ⅳ期(P=0.000,P<0.05),Ⅲ期与Ⅳ期(P=0.000,P<0.05),均有统计意义。3.侵润程度不同的胃癌患者之间血清MACC1蛋白水平比较(P=0.004,P<0.05),有统计差异。侵润突破固有层(侵犯结缔组织和脏层腹膜或邻近组织)的T3+T4期胃癌患者血清MACC1蛋白明显高于肿瘤局限于固有层的T0+T1+T2期患者(P=0.002,P<0.05)。4.胃癌发生淋巴转移的患者比无淋巴转移患者,血清MACC1蛋白升高显著(Z=-3.597,P=0.000,P<0.05)。5.胃癌患者发生远处转移后,血清MACC1蛋白升高明显高于无远处转移患者(Z=-5.537,P=0.000,P<0.05)。6.病例组中,血清MACC1蛋白在女性与男性之间比较(Z=-0.420,P=0.674,P>0.05),血清MACC1蛋白与患病年龄相关性(r=-0.039,P=0.642,P>0.05),均无统计差异。7.MACC1基因rs975263、rs4721888、rs1990172三个位点的基因型频率、等位基因频率,病例组与健康对照组比较均无统计意义。8.rs975263、rs4721888、rs1990172三个位点的基因型与患病年龄相关性分析均无统计差异。9.rs975263、rs4721888、rs1990172三个位点构建的显性模型、隐性模型均与胃癌发病风险无关。10.rs975263、rs4721888、rs1990172三个位点构建的单体型与胃癌发病风险无关。11.校正年龄性别等影响因素后,经过logistic回归统计后,结果发现:rs975263位点AG基因型与健康对照组AA基因型比较(P=0.017,OR=2.852,95%CI=1.210~6.721),rs1990172位点AC基因型与健康对照组CC基因型比较(P=0.036,OR=0.383,95%CI=0.156~0.940),差异均有统计意义。结论:1.胃癌患者血清MACC1蛋白明显比健康对照组升高,且血清MACC1蛋白与胃癌TNM分期、肿瘤侵润深度、淋巴转移、远处转移等相关。MACC1蛋白在胃癌早期(Ⅰ+Ⅱ)与Ⅲ期、Ⅳ期胃癌患者的血清中表达依次增高;侵润突破固有层的T3+T4期胃癌患者血清MACC1蛋白比肿瘤局限于固有层的T0+T1+T2期患者升高;同时在有淋巴转移和远处转移胃癌患者血清中MACC1蛋白表达比无淋巴和远处转移患者升高。血清MACC1蛋白可能是胃癌侵润转移恶化的标志物。2.当Cut-off值为228.67pg/ml时,敏感性63.27、特异性74.51%,对胃癌具有一定的临床诊断及预后价值。3.MACC1基因rs975263位点AG基因型可能增加胃癌患病风险,rs1990172位点AC基因型可能降低胃癌患病风险。4.MACC1基因rs975263、rs4721888、rs1990172三个位点基因型的显性模型、隐性模型,三位点构建的单倍型等均与胃癌患病风险无关。5.MACC1基因rs975263、rs4721888、rs1990172三个位点的不同基因型与血清MACC1蛋白水平之间无相关关系。