硫化氢对大鼠急性肺损伤白介素-4及巨噬细胞炎性蛋白-2表达的影响

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目的:探讨硫化氢(H2S)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)中白介素-4(interleukin-4, IL-4)和巨噬细胞炎性蛋白-2(macrophage inflammatory protein-2, MIP-2)表达的影响,以及H2S对ALI是否具有保护作用及其可能的机制。方法:健康雄性SD大鼠27只,随机分为正常对照组,ALI组和NaHS干预组,每组9只。(1)正常对照组:腹腔注射生理盐水0.5ml,10分钟后尾静脉注射生理盐水(2ml/kg);(2)ALI组:腹腔注射生理盐水0.5ml,10分钟后尾静脉注射LPS (5mg/kg)制造大鼠ALI模型;(3) NaHS干预组:腹腔注射NaHS (28μmol/kg),10分钟后尾静脉注射LPS (5mg/kg)。观察各组大鼠活动、精神情况、发绀等一般状态的变化,在各组尾静脉注射6小时后将大鼠处死,留取大鼠肺泡灌洗液和肺组织标本。肉眼观察各组肺组织大致改变,取右上肺用福尔马林固定、石腊包埋切片行HE染色,光镜下观察肺组织的病理变化;解剖颈部暴露气管行插管灌洗,每次4℃生理盐2mL重复灌洗3次,用单层纱布过滤,离心后行细胞总数计数,酶联免疫吸附测定(ELISA)肺泡灌洗中IL-4及MIP-2的浓度。结果:1.肺泡灌洗液中细胞总数的变化:正常对照组大鼠BALF中细胞总数为2.16±0.36(×109/L); ALI组大鼠BALF的细胞总数为13.524±2.73(×109m)两组比较,ALI组大鼠BALF中细胞总数显著升高(P<0.05);NaHS干预组BALF中细胞总数为9.92±1.93(×109/L),低于ALI组,但仍高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.肺泡灌洗液中IL-4的变化:正常对照组大鼠BALF中IL-4浓度为5.28±0.32pg/ml; ALI组BAL中IL-4的浓度是5.99±0.63pg/ml,与正常对照组比较显著增加(P<0.05);NaHS干预组BALF中IL-4为6.62±0.59pg/ml,较正常对照组与ALI组均升高,且差异具有统计学意义(P<0.05)。3.肺泡灌洗液中MIP-2的变化:正常对照组大鼠BALF中MIP-2的浓度是1.66±0.18pg/ml, ALI组BALF中MIP-2的浓度为2.99±0.79pg/ml,与正常对照组比较显著增加(P<0.01);NaHS干预组BALF中MIP-2的浓度为2.14±0.19pg/ml,较ALI组低,但仍高于正常对照,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.在脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤肺泡灌洗液中IL-4及MIP-2表达增高;2.硫化氢干预后,IL-4在急性肺损伤中的表达增加,MIP-2在急性肺损伤中的表达减少;3.硫化氢对脂多糖诱导的急性肺损伤可能通过促进IL-4表达与抑制MIP-2的表达起保护作用。
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