【摘 要】
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随着养羊业向集约化、规模化发展,人工授精技术也逐渐被广泛应用。精液保存是人工授精技术的关键环节,对于提高优种公畜的利用率,推进家畜的遗传改良工作有重要意义。在精液保存过程中,精子从体内到体外的环境差异打破了其本来所处环境的动态平衡,在此期间会产生大量活性氧,过量活性氧会与精子质膜发生氧化反应,破坏精子功能和结构完整性,降低精液品质,直接影响母畜的受胎率。为了减少活性氧对精子的氧化损伤,提高绵羊精液
【基金项目】
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青年三晋学者专项（2016）； 山西省自然科学基金（201901D111234,20210302123363）； 山西省现代农业产业技术体系建设专项； 山西省“1331工程”重点学科建设专项；
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随着养羊业向集约化、规模化发展,人工授精技术也逐渐被广泛应用。精液保存是人工授精技术的关键环节,对于提高优种公畜的利用率,推进家畜的遗传改良工作有重要意义。在精液保存过程中,精子从体内到体外的环境差异打破了其本来所处环境的动态平衡,在此期间会产生大量活性氧,过量活性氧会与精子质膜发生氧化反应,破坏精子功能和结构完整性,降低精液品质,直接影响母畜的受胎率。为了减少活性氧对精子的氧化损伤,提高绵羊精液低温保存效果,本试验在筛选出的基础稀释液中先添加Mitotempo再添加谷胱甘肽,探讨不同浓度的Mito-tempo和谷胱甘肽对绵羊精液低温保存效果的影响。主要研究结果如下:1.基础稀释液筛选的结果表明,在保存期间,50μM槲皮素+37.5μM白藜芦醇组精子活力显著高于100 m M谷胱甘肽组及混合添加组（P＜0.05）,第3 d、4 d、5 d精子活力显著高于2.5μM Tempol+15μM芹菜素组（P＜0.05）。在保存期间,50μM槲皮素+37.5μM白藜芦醇组精子活率与2.5μM Tempol+15μM芹菜素组无显著性差异（P＞0.05）,且两组均显著高于100 m M谷胱甘肽组及混合添加组（P＜0.05）。在保存期间,50μM槲皮素+37.5μM白藜芦醇组精子VCL显著高于100 m M谷胱甘肽组及混合添加组（P＜0.05）,除第3 d外,显著高于2.5μM Tempol+15μM芹菜素组（P＜0.05）。第2 d、4 d、5 d 50μM槲皮素+37.5μM白藜芦醇组精子VSL显著高于2.5μM Tempol+15μM芹菜素（P＜0.05）。表明,在绵羊精液低温保存稀释液中添加50μM槲皮素+37.5μM白藜芦醇对提高保存后精子运动能力有更好的效果。2.稀释液再添加Mito-tempo的试验结果表明,在保存期间,30μM处理组的精子活力、活率、VAP、DNA完整性、顶体完整性、线粒体活性均显著高于对照组（P＜0.05）,除第2 d外,30μM处理组的质膜完整性显著高于对照组（P＜0.05）。第3 d、4 d、5 d 30μM处理组的线粒体活性显著高于15μM处理组（P＜0.05）,精子质膜完整性显著高于45μM处理组（P＜0.05）。第4 d、5 d 30μM处理组的顶体完整性显著高于15、45μM处理组（P＜0.05）。在保存期间,30μM处理组精清中的SOD活性、T-AOC均显著高于对照组（P＜0.05）,MDA含量显著低于对照组及60μM处理组（P＜0.05）。表明,在添加50μM槲皮素+37.5μM白藜芦醇的精液低温保存稀释液中再添加适量的Mito-tempo（30μM）还可有效提高低温保存的绵羊精液质量。3.Mito-tempo稀释液中再添加谷胱甘肽的试验结果表明,在保存期间,4 m M谷胱甘肽组的精子活力、活率、DNA完整性、线粒体活性及精清中SOD活性均显著高于对照组（P＜0.05）,第3 d、4 d、5 d精子质膜完整性、顶体完整性及精清中T-AOC均显著高于对照组（P＜0.05）。此外,在保存期间,4 m M处理组的精子质膜完整性、DNA完整性、顶体完整性与2 m M处理组无显著性差异（P＞0.05）,2 m M处理组、4 m M处理组的精子线粒体活性和8 m M处理组无显著性差异（P＞0.05）。除第2 d外,2 m M处理组的DNA完整性、顶体完整性在保存期间显著高于16 m M处理组（P＜0.05）。表明,用50μM槲皮素+37.5μM白藜芦醇+30μM Mito-tempo+4 m M谷胱甘肽配制的稀释液低温保存绵羊精液的质量最好,有推广应用前景。
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