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目的:肾缺血-再灌注损伤(RIRI)是临床工作中经常遇到的问题,在一些肾脏手术如肾实质切开取石、肾部分切除、肾蒂损伤修复等手术中,暂时阻断肾脏血流是必要的。作为一名麻醉工作者临床上也经常会遇到急性肾缺血、急性肾功能衰竭等情况。如何减轻和防治肾缺血-再灌注损伤,一直是人们对肾脏损伤保护的主要研究课题。肾缺血-再灌注损伤的发主要机制为:氧自由基增多、细胞内钙超载和钙震荡、细胞内PH和渗透压的改变、内皮细胞的激活、中性粒细胞介导的损伤、微血管损伤、细胞因子和核因子-KB(NF-KB)等所引起的损伤以及肾脏组织细胞的凋亡。目前关于如何减轻或防治肾缺血-再灌注损伤的研究甚多,但其临床实用价值均不大。为寻求更大的临床实用价值,近年来关于如何启动内源性抗损伤机制成为研究的热点,关于腺苷A1受体激动剂的研究就是其中的热点之一。目前国内关于腺苷A1受体在心脏、脑等器官缺血-再灌注损伤保护作用的研究已有大量报道,但目前国内尚无关于腺苷A1受体激动剂在肾缺血-再灌注损伤中作用的报道。本实验通过建立大鼠肾缺血-再灌注损伤模型,探讨氮6-环戊基腺苷(N 6 - Cyclopentyl adenosine,CPA)对大鼠肾缺血-再灌注损伤的保护作用,为寻找防治肾缺血-再灌注损伤有效的药物提供实验依据。方法:32只Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠,体重250-300g,随机分为4组,每组8只,①假手术组(S组),②缺血-再灌注组(I/R组),③CPA预先给药+缺血-再灌注组(C组),④CPA+8-环戊基-1,3-二丙基黄嘌呤(8-Cyclopentyl-1,3- 2-propyl xanthine ,DPCPX)预先给药+缺血-再灌注(CD组)。10%水合氯醛3ml/kg腹腔注射麻醉,一侧颈内静脉穿刺,0.9%生理盐水8ml/kg·h持续泵入。采用夹闭双侧肾蒂45min,再灌注24h制备肾缺血-再灌注损伤模型。用无创动脉夹夹闭双侧肾蒂,肾脏颜色由红变为紫红色即可确认肾血流被阻断,造成肾缺血45min后,松开动脉夹,肾脏由紫红色恢复为红色即可确认血流恢复。①假手术组(S组):仅行开腹,游离双侧肾脏,分离双侧肾蒂但不夹闭,伤口用生理盐水纱布覆盖,暴露45min不做肾缺血处理;②缺血-再灌注组(I/R):暴露肾脏后夹闭双侧肾蒂,缺血45min后开放动脉夹,再灌注24h;③CPA+缺血45min再灌注24h组(C组):CPA 1.0 mg/kg在夹闭肾蒂前15 min腹腔内注射,余操作同I/R组④:CPA+DPCPX预先给药+缺血45min再灌注24h组(CD组);CPA 1.0 mg/kg DPCPX 1.0 mg/kg在夹闭肾蒂前15 min腹腔内注射,余操作同I/R组。所有动物均于再灌注24h时处死。酶法测定血清肌酐(creatinine,Cr)水平、苦味酸不除外蛋白法测定血清尿素氮(usea nitrogen,BUN)水平;比色法测定肾组织丙二醛(malondidehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase ,SOD)活性、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)含量;肾组织制备肾脏单细胞悬液,经碘化丙啶(propidine iodide,PI)染色后用流式细胞分析法测定肾脏细胞凋亡率。苏木素-伊红(hematoxylin -eosin,HE)染色观察肾组织病理学变化。结果:1血清Cr和BUN浓度变化与S组比较,再灌注24h时,I/R组、C组、CD组血清Cr和BUN浓度明显升高(P﹤0.05)。与I/R,CD组比较,C组Cr和BUN浓度明显降低(P﹤0.05); I/R组和CD组之间比较差别不大(P﹥0.05)。2肾组织的SOD活性和MDA含量MPO含量的变化与S组相比,I/R组、C组、CD组肾组织SOD活性均降低,MDA,MPO含量均升高(P﹤0.05);与I/R,CD组比较,C组SOD活性升高,MDA,MPO含量均减少(P﹤0.05)。I/R组和CD组之间比较差别不大(P﹥0.05)。3光镜下观察肾组织的病理改变S组肾小球、肾小管未发现明显的形态学改变。I/R组肾小球细胞数量减少,部分肾小球局部有坏死,球丛毛细血管扩张充血,内有炎细胞浸润,肾小管上皮细胞严重水肿、坏死、脱落,管腔狭窄,部分肾小管腔内可见蛋白管型。间质内血管扩张充血,有炎细胞浸润。C组球从毛细血管扩展充血比I/R组减轻,少量炎细胞浸润,肾小管上皮水肿减轻部分肾小管腔内可见少量蛋白管型。CD组与I/R组相比无明显变化。4肾组织细胞凋亡率的变化与S组相比,I/R组、C组和CD组肾组织细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。与I/R组相比C组肾组织细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。与CD组比较C组肾组织细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。I/R组与CD组比较差别不大(P>0.05)。结论:1氮6-环戊基腺苷可减轻大鼠肾缺血-再灌注损伤,改善肾功能。其主要机制可能与通过激活腺苷A1受体,清除氧自由基,增强SOD活性,减轻脂质过氧化反应,抑制细胞凋亡有关。2氮6-环戊基腺苷对大鼠肾缺血-再灌注损伤有一定的保护作用。