目的:自2012年以来,鸡包涵体肝炎的暴发呈上升趋势,主要表现为血清4型引起的心包积水和鸡包涵体肝炎。目前,对于4型禽腺病毒抗体快速检测方法比较少,大多数传统检测方法不仅检测复杂,而且不能大规模的应用到生产实践中。对于4型禽腺病毒疫苗的防控,国内尚没有获得许可的商品化禽腺病毒疫苗。因此本实验利用禽腺病毒截短的纤突蛋白作为抗原,由实验室自制亚单位疫苗免疫动物后进行效力评价,为有效防控禽4型腺病毒病提供的新途径,同时利用该蛋白制备禽腺病毒病抗体检测试纸条,为后续禽4型腺病毒病诊断研究提供新方法。方法:通过前期筛选选择对纤突蛋白-2从氨基酸283位到氨基酸479位,获得包含纤突-2抗原蛋白决定簇氨基酸序列,然后利用大肠杆菌原核表达系统进行表达、纯化后得到抗原蛋白,将获得抗原蛋白与佐剂乳化后得到亚单位疫苗,然后免疫3周龄SPF鸡只,采用免疫攻毒法和血清中和法对该亚单位疫苗的效力进行评价,免疫和攻毒后不同时期采血备用。将纤突蛋白-2抗原蛋白应用免疫层析技术制备胶体金试纸条,作为4型禽腺病毒抗体检测方法。结果:4型FAd V原核表达后,纤突-2蛋白浓度3269 μg/mL,纯度可达90%以上。免疫攻毒实验结果表明纤突-2蛋白亚单位疫苗最低免疫剂量能达到2.5/羽,保护率达95%以上;血清中和试验结果表明免疫后分离的鸡只血清中和抗体效价可达1:1000;胶体金试纸条试验结果表明纤突-2抗原蛋白制备的胶体金试纸条能够检测出纤突-2亚单位疫苗免后鸡只的抗体水平,其阳性信号均值在维持在300以上,阴性鸡只信号均值在10～50之间。结论:本实验制备FAd V纤突-2蛋白亚单位疫苗免疫鸡只后具有良好的保护效果,能够保护鸡只免受强毒的攻击。由本实验初步制成了 FAd V纤突-2蛋白免疫胶体金试纸条。