【摘 要】
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高致病力禽流感病毒(HPAIV)是我国出口禽肉中风险最大的A类传染病病原。通过对目前常用的禽流感检测技术如琼脂凝胶扩散试验(AGP)、血细胞凝集抑制试验(HI)、鸡胚病毒分离试验、ELI
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高致病力禽流感病毒(HPAIV)是我国出口禽肉中风险最大的A类传染病病原。通过对目前常用的禽流感检测技术如琼脂凝胶扩散试验(AGP)、血细胞凝集抑制试验(HI)、鸡胚病毒分离试验、ELISA方法、免疫荧光技术和实时荧光RT-PCR技术等试验方法的分析,探讨了这些方法的的优缺点和在检验检疫领域应用的适用性,重点介绍了最具有应用优势的荧光RT-PCR方法检测禽流感技术在检验检疫领域的应用。 试验研究表明,荧光RT-PCR有很强的敏感性和特异性。在检测禽流感感染的尿囊液时,尿囊液稀释至10-7仍可检出病毒核酸,荧光RT-PCR方法的特异性也很强,检测时与禽群常用的疫苗如新城疫弱毒疫苗、传染性支气管炎弱毒疫苗等均不出现交叉反应。 注射禽流感疫苗免役肉鸡5天后,不论是皮下注射还是肌肉注射,用荧光RT-PCR方法检测,在胸肌和腿肌中均检不出病毒核酸,说明注射疫苗对检测结果无影响。 根据国家质检总局要求,出口企业的禽群不能注射禽流感疫苗,结合常规血凝和血凝抑制试验来监测禽群抗体,利用建立的通用型荧光RT-PCR方法快速检测出口禽和/或禽肉中可能存在的禽流感病毒,把出口禽和/或禽肉的风险降至最低,促进对外贸易的顺利发展。 在检验检疫实际工作中,为了加快通关速度,要求检测技术快速、敏感、特异。通用型荧光RT-PCR快速检测方法检测组织脏器中的A型禽流感病毒,在敏感性方面与鸡胚分离方法基本相同。荧光RT-PCR技术通过电脑分析PCR过程中产生的荧光信号,实时、在线检测PCR扩增过程而无需对PCR扩增产物进行后处理,从而克服了传统PCR技术易污染的缺点,在检验检疫领域具有广阔的应用前景。
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