目的：发现心肌M3受体作为抗心律失常药物靶点的作用新机制. 方法：应用去糖基化试剂确定大鼠心室肌M<,3>受体的不同结构形式；通过免疫组化结合激光共聚焦显微镜，及免疫沉淀与免疫印迹技术，研究大鼠心室肌M受体与间隙连接蛋白43的结构整合关系。应用免疫印迹技术检测正常状态、缺血不同时间点以及胆碱预处理时大鼠心室肌M<,3>受体与间隙连接蛋白43蛋白表达量的变化，及它们之间相互调控、相互影响的关系。用免疫组化单标记法检测在H<,2>O<,2>诱导的心肌细胞凋亡中间隙连接蛋白43的表达；建立离体心脏缺血再灌注损伤模型，并给予M3受体的激动剂与阻断剂进行干预，用western印迹以及免疫组化的方法检测间隙连接蛋白43的表达。用激光共聚焦显微镜技术和荧光免疫组化对间隙连接蛋白43在心肌分布、数量上的变化进行分析。用RT-PCR的方法检测不同组间隙连接蛋白43 mRNA表达量的变化。用荧光信号划痕法检测激动M3受体对细胞间电信号的作用。 结果：(1)应用免疫印迹技术稳定检测到M<,2>/M<,3>受体及间隙连接蛋白43，确定了它们在大鼠心室肌的表达：发现表达于大鼠心室肌的M<,3>受体存在非糖基化和糖基化修饰两种形式。(2)应用免疫染色技术发现在心肌细胞膜某些区域，间隙连接蛋白43与M<,3>受体紧密整合；应用M<,2>/M<,3>的特异性抗体对心肌细胞裂解液进行免疫沉淀反应，聚丙烯酰胺凝胶电泳可在44 kDa分离出一条带，而该条带可被间隙连接蛋白43的特异性抗体识别。给予一定浓度离子型去垢剂可破坏M<,3>受体与间隙连接蛋白43的结构整合关系，进一步研究发现参与M<,3>受体结构整合的是间隙连接蛋白43的磷酸化形式。(3)随缺血时间延长，大鼠心室肌M<,3>受体表达量明显增加，而缺血过程对其他M受体(M<,1>、M<,2>、M<,4>、M<,5>受体)的表达无显著影响；相反，缺血过程中间隙连接蛋白43的表达量显著降低。(4)缺血可抑制M<,3>受体与间隙连接蛋白43的相互作用，但对M<,2>受体与间隙连接蛋白43的整合关系无显著影响。(5)胆碱预处理不但可部分恢复间隙连接蛋白43的表达，还可逆转缺血对M<,3>受体与间隙连接蛋白43相互作用的抑制。(6)激动M<,3>受体可以改善病理条件下间隙连接蛋白43的重构，而胆碱加4DAMP阻断了这一作用。在病理条件下，间隙连接蛋白的表达减少；预先给与M3受体激动剂胆碱，间隙连接蛋白的表达又恢复了正常水平；而胆碱加4DAMP组，间隙连接蛋白的水平又减少，接近于停止灌流组。(7)激动M3受体可以改善病理条件下细胞间电信号的传导，而胆碱加4DAMP阻断了这一作用。 结论：(1)大鼠心室肌M3受体亚型与间隙连接蛋白43的磷酸化形式存在整合关系，且可被一定浓度离子型去垢剂破坏。(2)M<,3>受体在缺血过程中表达增多，发挥其心肌保护作用；而间隙连接蛋白43表达下降，预示缺血过程中细胞间解偶联过程的发生。(3)缺血可损伤大鼠心室肌M<,3>受体与间隙连接蛋白43的整合关系，而胆碱可通过激动M<,3>受体逆转缺血的影响。(4)激动M3受体可以改善病理条件下间隙连接蛋白43的重构，同时，间隙连接蛋白43的蛋白磷酸化形式在闰盘重构中发挥重要的作用；激动M3受体可以恢复病理条件下下降的间隙连接蛋白43的蛋白水平及mRNA水平。(5)激动心肌M3受体可以改善改善细胞间的电信号传导，发挥抗心律失常的作用。