最近10多年来,已有许多证据表明过氧化氢和一氧化氮作为信号分子参与植物的各种生理过程,如生长发育,病原体防御反应,程序性细胞死亡和胁迫抗性反应等。前人已经证明H₂O₂和NO都能影响气孔运动,但是二者是否参与光/暗调控的气孔运动还不清楚。另外,细胞分裂素和生长素调控的气孔运动是否与H₂O₂和NO有关也未见报道。本文以蚕豆下表皮为材料,用表皮条分析和激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）技术研究了H₂O₂和NO在光/暗调控气孔运动中的作用和相互关系以及二者在该过程中的来源,还对细胞分裂素和生长素影响气孔运动与H₂O₂和NO的关系也进行了一定的探索。结果如下: 1.光下外源H₂O₂和SNP均能诱导气孔关闭,而且在一定的范围内都具有剂量和时间的依赖效应。与光下相比,暗中外源H₂O₂和SNP对气孔开度均无显著性的影响,用cPTIO、L-NAME、ASA、CAT和DPI等却能有效地逆转黑暗诱导的气孔关闭（p<0.01）,而在光下几乎不影响气孔孔径。由此推测光下暗中内源H₂O₂和NO含量是不同的,暗中二者水平较高,而光下较低,而且暗中诱导产生内源H₂O₂和NO是黑暗诱导气孔关闭不可缺少的组分。实验用H₂O₂和NO特异性荧光探针结合LSCM得到结果表明,暗中内源H₂O₂和NO的荧光很显著,而光下较低。ASA、CAT和DPI均能抑制黑暗诱导产生的H₂O₂荧光。同样,cPTIO和L-NAME能阻止黑暗产生的NO荧光。这些证据清楚地证明了黑暗可以诱导产生内源H₂O₂和NO,黑暗诱导的气孔关闭是通过H₂O₂和NO介导的。DPI和L-NAME不但能逆转黑暗诱导的气孔关闭而且抑制黑暗诱导的H₂O₂和NO产生表明蚕豆保卫细胞H₂O₂和NO的来源可能分别与NADPH氧化酶和NOS类似物途径有关。 2.外源H₂O₂在光下处理表皮条能够引起保卫细胞产生NO荧光,cPTIO和L-NAME能够抑制该过程,而cPTIO和L-NAME也能逆转H₂O₂光下引起的气孔关闭。说明内源NO的产生是H₂O₂引起气孔关闭所不可缺少的,而且H₂O₂诱导产生的NO也是NOS类似物途径。另外,CAT和DPI也能逆转黑暗引起的NO产生,说明内源H₂O₂的积累与黑暗诱导产生NO也有关系。有趣的是,光下SNP也能够引起保卫细胞中H₂O₂的积累,该过程能被ASA、CAT和DPI所阻断,而且ASA和CAT