不同生理条件下核糖体组成的动态变化以及其对翻译调控效应的探索

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核糖体作为细胞中含量最多,最为复杂,也最消耗能量的RNA-蛋白复合体之一,主要负责细胞内蛋白质的合成,对细胞的生长、组织的分化、和物种的发育等重要过程都有关键的作用和意义。自2007年“ribosome code”这一假说被提出,尚无明确证据证明支持其存在的合理性及意义。本实验室前期相关课题实验结果明确暗示了在酵母体内,同源双拷贝核糖蛋白在功能上有明显的不同,通过本课题进一步研究发现同源双拷贝核糖蛋白组装的核糖体在功能上也有明显的分化。以酵母核糖蛋白RPL36A和RPL36B为例,将两个核糖蛋白分别加上不同的标签,发现这两个蛋白组装的核糖体对不同蛋白的翻译效率不同。通过免疫共沉淀纯化出RPL36A和RPL36B组装的核糖体并做质谱检测后发现两种核糖体的蛋白组成明显不同,二者各有其特有蛋白,并且二者共有的蛋白其含量也有明显差异,分析二者组成蛋白所参与的生化反应路径发现二者各有不同的路径,共同参与的路径其不同的核糖体P值也有所不同。进一步分析两种核糖体所翻译的m RNA发现两种核糖体所翻译的m RNA有明显区别。RPL36A参与组装的核糖体偏好于翻译产物在核内执行功能的m RNA,RPL36B组装的核糖体则偏好翻译其产物在核外执行功能的m RNA。通过以上实验结果可以很明确的揭示不同核糖体不论是组成还是功能都有明显的区别。明确证实了ribosome code假说的合理性和正确性。同时实验结果揭示在核糖体上,包含有大量的和代谢相关的蛋白,相信这些蛋白与核糖体的结合不是偶然,这也许暗示了核糖体除了执行翻译m RNA的功能外,也许存在其他的与其所附着的代谢蛋白相关的功能。这些明确的结果更新了我们对于核糖体这一细胞内重要细胞器的认识,同时一些结果中暗示的现象揭示了核糖体可能存在的新的功能。继续推进对这些根本的问题的探究能帮助我们了解细胞进化出不同类型核糖体的作用和意义,也能促进我们更深入地了解翻译调控的机制。
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