表阿霉素（Epi）是一种蒽环类小分子毒性抗肿瘤药,对人的多种实体瘤均有不同程度的抑制作用,但在使用中易产生骨髓抑制、心脏毒性等严重不良反应。因此,运用特殊导向物与Epi交联,设计合成无毒或低毒的前体药物,已成为近年来研究的热点。成纤维细胞激活蛋白α（FAPα）是特异性表达于肿瘤相关成纤维细胞表面的抗原分子,且具备特殊的肽链内切酶活性,研究发现FAPα能够特异性识别Z-Gly-Pro（Z-GP）。基于此,本研究通过化学方法合成制备Z-GP-Epi,经高温实验、高湿实验、光照实验、加速实验等对Z-GP-Epi稳定性进行初步考察;并验证Z-GP-Epi的靶向释放情况;通过药代动力学研究评价Z-GP-Epi在体内的动态变化规律和分布特征,为Z-GP-Epi的实际使用和工业生产提供理论支撑。具体研究内容及结果如下:1)三批合成实验证实以苄氧羰基酰甘氨酸、Pro和Epi为原料制备前药Z-GP-Epi的工艺条件重复性和重现性良好,合成制备工艺稳定、可靠,具备大批生产的可行性。高温、高湿和光照等影响因素实验及6个月的加速实验结果表明,前体药物Z-GP-Epi在高温、光照和加速条件下具备良好的稳定性,在高湿条件中有一定的引湿性。Z-GP-Epi宜保存在常温的真空环境中。2)细胞毒性实验和酶解实验结果显示,对于正常细胞株小鼠成纤维细胞NIH3T3、肿瘤细胞株小鼠乳腺癌细胞4T1及人乳腺癌细胞MCF-7的细胞毒性作用,Z-GP-Epi较之母药Epi显著降低,Epi经Z-GP结构修饰后活性部分被成功封闭。同时,Epi能够在FAPα的特异性酶解作用下从前体药物Z-GP-Epi中有效释放出来。3)早期药代动力学研究表明,a.大鼠单剂量注射Z-GP-Epi后,其在血浆内的经时变化过程呈线性动力学特征,与Epi的血浆经时变化过程一致。b.Z-GP-Epi不改变母药Epi主要从胆道排泄的特征,但与母药Epi相比,Z-GP-Epi在胆汁中累积量更多、消除更快。同时,P-gp抑制剂红霉素可显著降低Epi及Z-GP-Epi在胆汁中的排泄量,推测Z-GP-Epi在体内的转运过程仍与母药Epi相似,为P-gp介导的药物体内转运过程。c.Z-GP-Epi在给药4 h内,心、肝、肺、肾、脾中药物的含量顺序为肺＞脾＞肝＞肾＞心,而后则以肝脏中药物含量最多,心脏的药物含量最小,给药2h后,Z-GP-Epi在心脏的蓄积量已低于检测限。而Epi的MRT为8.713h,因此提示Z-GP-Epi在心脏组织的蓄积低于母药Epi。d.靶向参数结果表明:前药Z-GP-Epi在血浆、肝脏、肺脏、脾脏的靶向性明显高于母药;Z-GP-Epi在血浆、心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏的分布具有差异项,尤以在肺脏组织的分布差异大,提示Z-GP-Epi可能对肺癌有一定的针对性。综上,以苄氧羰基酰甘氨酸、Pro和Epi为原料制备的前药Z-GP-Epi的工艺条件重复性和重现性良好,合成制备工艺稳定、可靠。经Z-GP-Epi的细胞毒性实验、酶解实验、早期药代动力学实验等结果一致表明,经特异性二肽Z-GP修饰后Epi的活性位点成功封闭,对肿瘤细胞和正常细胞的毒性作用明显降低,在母药Epi的主要毒性靶器官心脏的分布亦明显减少,且Z-GP-Epi在FAPα特异性酶解作用下可有效释放Epi。相关研究结果及研究方法,为Z-GP-Epi的进一步研究提供了重要的实验依据,同时为基于FAPα的酶激活式靶向抗肿瘤策略提供了一些新的思路,为肿瘤靶向治疗研究提供了重要的参考依据。