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生命体内庞大的血管网络为细胞供应充足的氧气和养分是实现细胞代谢和功能的关键。血管内皮细胞作为血管结构的重要组成部分之一,具有调节细胞活性分子表达、血管新生以及血管渗透性的功能。因此,仿生构建具有调节血管内皮细胞粘附、增殖、生存的细胞外基质(ECM),是解决人工构建功能性组织或器官时缺乏充足血管系统问题的方法之一。本文利用基因重组技术,分别构建了含有血管内皮细胞生长因子(VEGF)、免疫球蛋白IgG的Fc段基因序列的重组质粒pcDNA3.1-VEGF-Fc和含有VEGF、MMP-2特异内切底物和Fc段基因序列的重组质粒pcDNA3.1-VEGF-SMP-Fc。用人胚胎肾293F细胞真核体系表达融合蛋白VEGF-Fc和蛋白酶敏感型融合蛋白VEGF-SMP-Fc,且经蛋白质A亲和层析色谱柱纯化后,两种融合蛋白纯度均达到85%以上。再分别将纯化的融合蛋白物理吸附固定在疏水聚苯乙烯材料表面,形成生长因子型人工ECM和蛋白酶敏感型人工ECM。结果表明,融合蛋白VEGF-Fc构建的人工ECM显著性提高人脐带血管内皮细胞(HUVECs)在疏水材料表面的粘附能力,并且在72h内有效促进HUVECs增殖。通过细胞骨架染色,可以明显看出在融合蛋白VEGF-Fc基质表面生长的内皮细胞诱导肌动蛋白纤维重新组合形成应力纤维。且生长因子型人工ECM能有效调节内皮细胞功能性分子的表达,在基质表面快速形成内皮层,进而调节血管的形成和渗透性。此外,与商品化VEGF-165的半衰期(约12h)相比,融合蛋白形式存在的VEGF(VEGF-Fc和VEGF-SMP-Fc)的半衰期提高到96h。MMP-2敏感型融合蛋白VEGF-SMP-Fc通过其Fc段和聚苯乙烯表面的疏水作用,稳定的固定在疏水聚苯乙烯表面,形成蛋白酶敏感型人工ECM。通过MMP-2含量的变化可以实现VEGF控制释放。