烟草青枯病与黑胫病拮抗菌筛选及防治效果研究

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土传病害是危害烟草生产的毁灭性病害,在我国烟草生产中最为严重的是烟草青枯病和黑胫病。国内外对此类病害的防治进行了大量的研究,包括化学防治、生物防治、培育抗病品种以及栽培管理措施等,但由于各自的局限性而无法从根本上进行根治。本文从生态学的原理出发,从病害的原位土壤中分离筛选出对病原菌具有拮抗效果的微生物制成生态有机肥来防治土传病害,在防病的同时,还可以起到改善和修复土壤生态环境,减少化学肥料和农药使用,改善烟叶品质和实现烟叶生产的可持续发展。本文针对烟草青枯病和黑胫病进行拮抗菌的筛选,共得到6株防治青枯病和8株防治黑胫病的拮抗菌,并研究了黑胫病拮抗菌的发酵条件及它们的田间效果验证,研究结果如下:1从福建邵武的青枯病烟株中分离并鉴定出青枯病原菌,并从原位土壤中分离出土壤细菌40株,经平板对峙试验筛选出青枯病的拮抗菌6株,分别编号为T1~T6,拮抗带在4.7~21.4mm之间,其中T5的拮抗效果最好,拮抗带达到10.4~21.4mm。2烟草青枯病拮抗细菌发酵条件的研究表明,抑制效果较好的拮抗菌T5在20~40℃范围内均能生长,最适宜的生长温度为35℃;4~24h为对数生长期:pH值为5.0~9.0。进行该菌的液体培养与扩增时,在相同的接种量下,250ml三角瓶的最佳装瓶量为120ml。通过正交试验法获较佳的液体培养基为蔗糖15 g/L、牛粪堆肥200 g/L、蛋白胨4 g/L、牛肉膏1.5g/L。3从河南农大科教园区的的黑胫病烟株中分离出致病的黑胫病原菌,并从原位土壤中分离出土壤真菌13株,,其中对黑胫病菌具有拮抗作用的有8株,分别编号为Ty1~Ty8,又从中选出拮抗效果较好且相互间无拮抗作用的Ty3、Ty4和Ty7,混合后拮抗效果加强。4通过对黑胫病的拮抗菌y3、Ty4和Ty7的发酵条件的研究表明,三种菌在液体培养条件下4~6d进入稳定生长期;在10~45℃的温度范围内都能生长,最适生长温度是20~35℃;三种菌的适宜生长的pH范围较广,在4.0~9.0的范围内都能生长良好;它们均为好氧菌,装瓶量越大,单位体积中的菌丝量越少;通过正交试验法获得三种混合菌的最佳液体培养基为蔗糖10g/L、牛粪堆肥200 g/L、蛋白胨0.5 g/L、酵母粉15 g/L。5通过拮抗菌生物制剂的田间效果验证结果表明,烟株的田间长势长相以及生长发育与对照是一致的,即拮抗菌及其生物制剂的施用不会对烟株生长造成不良影响;广西的灌根试验显示菌剂对烟草青枯病和黑胫病的发病率和病情指数具有一定的抑制作用,青枯病的防治效果:灌根一次和灌根两次的处理发病率比对照分别降低了8.9和39.6个百分点,病情指数分别降低了4和38;黑胫病的发病率降低了0.4和2.8个百分点,病情指数降低了2.70和4.32,可能具有一定的防治作用;福建邵武青枯病拮抗菌制成的生态菌肥连续两年的田间试验结果为,05年的防治效果不太明显,防治率在1.07%~3.22%之间,病情指数降低了0.54~2.15;06年在05年的基础上对青枯病的防治效果大大加强,发病率降低了30.69%~39.58%,病情指数降低了21.85~25.74,其中有机菌肥做基肥的处理效果最明显。6有机菌肥的施用特别是作为基肥施用使烤后烟的产量、产值以及上中等烟比例都比对照有了较大的提高,分别比对照增加了252.90 kg/hm~2、2619.90元/hm~2和0.36%,差异达到极显著水平。7通过对各处理烤后烟叶的品质分析表明,有机菌肥的施用降低了烟叶中的总氮、烟碱和蛋白质的含量,提高了总糖、还原糖和淀粉的含量,同时使烟叶中主要化学成分的比值趋于协调,有利于烟叶品质的提高。
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