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目的:COPD是一种常见的慢性呼吸道疾病,当前治疗主要以控制症状为主,本研究采用基因转染技术,将碱性成纤维细胞生长因子基因转染骨髓间充质干细胞后,与肺微血管内皮细胞共培养,观察转染后的干细胞对肺微血管细胞的作用,以探索治疗COPD的新思路及新方法。方法:选取4周龄的SD大鼠(雄雌不限),采用骨髓贴壁细胞培养法分离、培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)。外购b FGF-pc DNA3.1重组质粒,采用脂质体转染法将含有b FGF基因的质粒转染入BMSCs,荧光显微镜观察转染效率,Western-blot法观察重组质粒b FGF-pc DNA3.1转染及其目的蛋白的表达。转染后的b FGF-pc DNA3.1-BMSCs通过与肺微血管内皮细胞在transwell体系下共培养。本课题分为6个实验组,一个空白对照组,6个实验组分别为重组质粒组(A组)、空白质粒组(B组)、重组质粒转染组(C组)、空白质粒转染组(D组)、BMSCs组(E组)、PBS组(F组),空白对照组:单纯的肺微血管内皮细胞培养组,A组:重组质粒b FGF-pc DNA3.1与肺血管内皮细胞共培养,B组:空白质粒pc DNA3.1与肺血管内皮细胞共培养,C组:b FGF-pc DNA3.1-BMSCs与肺血管内皮细胞共培养,D组:pc DNA3.1-BMSCs与肺血管内皮细胞共培养,E组:BMSCs与肺血管内皮细胞共培养,F组:PBS液与血管内皮细胞共培养,以上各组细胞共培养后24h,48h,72h后观察肺微血管内皮细胞的增殖率情况。结果:1、成功提取并培养BMSCs,流式细胞仪表型检测CD29、CD90阳性,CD34及CD11B阴性,所鉴定的即为所需BMSCs;2、质粒转染BMSCs后,荧光显微镜可见绿色荧光蛋白,初步表转染成功;3、重组质粒携带的b FGF基因成功转染入BMSCs中并通过Western-blot法检测其大量表达b FGF蛋白;4、重组质粒转染组为肺血管内皮细胞增值率最高的组别,其与PBS组、重组质粒及空白质粒组的细胞增值率对比,其均P<0.05;与空白质粒转染组及BMSCs组相比,统计后均P>0.05,但其较空白质粒转染组及BMSCs组肺微血管内皮细胞的增殖率有增高趋势,且增高趋势随共培养时间延长,增高趋势越明显。空白质粒转染组与PBS组、重组质粒及空白质粒组的细胞增值率对比,均P<0.05,与BMSCs组相比,P>0.05。BMSCs组与PBS组、重组质粒及空白质粒组的细胞增值率对比,均P<0.05。结论:1.采用脂质体转染法成功将b FGF基因导入BMSCs并能大量表达b FGF蛋白;2.BMSCs具有刺激肺血管内皮细胞增殖作用;3.转染b FGF基因的BMSCs具有刺激肺微血管内皮细胞增殖作用且具有时间依赖性,较未转染b FGF基因的BMSCs作用更强,但统计后两组增值率差异无统计学差异。