双酚A与氯化镉对MCF-7细胞增殖及WISP-2和Bcl-2蛋白表达作用

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目的:通过细胞培养研究,探讨BPA与CdCl2对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的联合作用类型以及BPA是否能促进WISP-2基因的表达,并调控Bcl-2基因。在BPA联合CdCl2时,是否对WISP-2基因及Bcl-2基因表达产生影响。试探性解释WISP-2、Bcl-2基因在BPA与CdCl2时联合作用时诱导乳腺癌发生中的作用方法:以不同浓度的BPA和CdCl2作用于MCF-7细胞,用普通光镜观察24h后细胞形态的变化;采用MTT法分别检测BPA、CdCl2及BPA联合CdCl2后的MCF-7细胞增殖率的影响;用逆转录-聚合酶链反应(Q-PCR)方法及Western-blot方法,分别分析BPA及BPA联合CdCl2同时对WISP-2、Bcl-2mRNA、WISP-2和Bcl-2蛋白表达。设置雌二醇为阳性对照组,用SPSS13.0进行统计学分析比较。结果:1、BPA在一定浓度10-9mol/L~10-4mol/L下能促进MCF-7细胞增殖,但随着浓度增高,细胞增殖逐渐减少,到10-3mol/L时细胞增殖消失,表现为细胞毒性。与空白对照组相比差异具有统计学显著意义。BPA诱导MCF-7细胞的增殖在10-6mol/L达高峰,并在10-3mol/L浓度下开始抑制MCF-7细胞增殖。2、CdCl2能在一定浓度下模拟雌二醇作用,诱导MCF-7细胞增殖,并且在10-6mol/L达到高峰,并且随着浓度的增高在10-4mol/L开始抑制MCF-7细胞增殖。3、用BPA+CdCl2联合染毒染毒细胞后,MTT显示联合染毒组虽然促进MCF-7细胞增殖,但低于BPA及CdCl2单独作用MCF-7细胞时的增值率,且MCF-7细胞中WISP-2和Bcl-2的mRNA和蛋白的表达均低于单独染毒组。结论:1、BPA、CdCl2单独作用下在一定浓度下能促进MCF-7细胞增殖,两者单独作用对细胞增殖促进作用高于两者联合作用。2、BPA能促进WISP-2基因的表达,WISP-2基因能调控Bcl-2基因的表达。3、BPA与CdCl2联合作用于MCF-7细胞时,在一定浓度下,WISP-2基因和Bcl-2基因的表达均低于两者单独作用。
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