PEDV S和猪IL-18联合DNA疫苗免疫效果研究

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猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的以严重的呕吐、脱水和腹泻为主要特征的猪的一种急性高度接触性肠道传染病。该病的流行给养猪业带来了巨大的损失。目前,虽然商品化PEDV疫苗已广泛使用,但该病在我国仍有流行。因此,研制安全有效的PEDV疫苗仍然是防治该病的重要研究方向。   S蛋白是PEDV的重要结构蛋白,能诱导机体产生中和抗体,是研究PEDV基因工程苗的主要候选基因。本实验分别将PEDVS、PEDVS1与猪IL-18基因亚克隆到pVAX1真核表达载体中,构建了3种重组真核表达质粒pVAX1-PEDVS、pVAX1-PEDVS1和pVAX1-pIL-18。通过脂质体转染法将3个重组质粒转入BHK-21细胞中进行表达,试验结果表明,这3个基因都可以在体外进行表达,且表达的蛋白可以被PEDV和pIL-18多克隆抗体所检测。   本试验利用小鼠为实验模型,共分成7个组,分别为pVAX1-PEDVS组、pVAX1-PEDVS1组、pVAX1-pIL-18组、pVAX1-PEDVS1和pVAX1-pIL-18联合免疫组、PED疫苗组、PBS组以及pVAX1组。利用淋巴细胞增殖试验、酶联免疫吸附试验等方法对不同处理组小鼠的各项免疫指标进行了检测。   试验结果表明,PEDVS组和联合免疫组多数免疫指标都高于PEDVS1组,其中以联合免疫组免疫效果尤为突出。具体表现为:T淋巴细胞增殖功能,外周血中抗PEDV特异性抗体水平以及IFN-γ、IL-4的表达量,脾脏及外周血T淋巴细胞毒性作用与PEDVS1组比较都有明显的提高。   综上所述,pIL-18基因作为PEDVS抗原基因分子佐剂具有免疫增强作用。为进一步研究pIL-18生物活性提供了数据,同时为新型免疫增强型抗PEDV疫苗研究提供了理论基础。
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