以贡氏假鳃鳉为模型初步探讨与衰老相关的载脂蛋白E基因的功能

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载脂蛋白E(Apolipoprotein E,ApoE)主要由肝脏合成,与动脉粥样硬化等老年性疾病的发病有关,并且ApoE的基因多态性会导致个体发病率不同。贡氏假鳃鳉(Nothobranchius guentheri)属一年生鳉鱼,寿命较短,是适合研究衰老的模式动物。本文以贡氏假鳃鳉为模型对ApoE的抗氧化功能进行了初步探讨。  首先,对贡氏假鳃鳉的ApoE进行序列分析,发现贡氏假鳃鳉的ApoE较为保守。与斑马鱼、虹鳟的ApoE相似度较高,同源性分别达到40.8%、44.3%,且具有受体结合域和脂结合域。通过二级结构预测得知,贡氏假鳃鳉ApoE的二级结构主要以α-螺旋为主。  其次,构建了贡氏假鳃鳉的ApoE及其N端结构域和C端结构域的原核表达载体,并导入大肠杆菌Transetta(DE3)中进行诱导表达,得到重组蛋白并纯化。复性成功后,将目的蛋白与低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)孵育,同时加入Cu2+诱导LDL的氧化。结果表明,ApoE及其N端结构域有抑制LDL氧化的功能。  综上所述,贡氏假鳃鳉的ApoE及其N端结构域具有抗氧化的功能,我们推测对动脉粥样硬化等疾病的发病可能起到一定的抑制作用。但是关于ApoE3和ApoE4的抗氧化活性的比较,还在进一步探讨中,ApoE对机体衰老的影响还有待于进一步的研究探索。
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