大口黑鲈的PI3KR1及AKT1基因研究及饲料中添加白藜芦醇对其糖代谢及非特异性免疫的调控

来源 :上海海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:szRUIZHIZI
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
研究一:利用同源克隆技术和c DNA末端快速扩增(RACE)技术克隆大口黑鲈磷脂酰肌醇-3-激酶p85(PI3KR1)和蛋白激酶B1(AKT1)基因的全长序列,在此基础上,对上述基因进行多重序列比对及进化树分析。利用实时定量PCR技术检测PI3KR1和AKT1基因在组织中的表达差异。结果如下:1、大口黑鲈PI3KR1全长为4170 bp,其中5′端非编码区245bp,开放阅读框1389 bp,3′端非编码区2536 bp,共编码462个氨基酸。克隆所得大口黑鲈PI3KR1基因与大黄鱼的PI3KR1基因相似度较高。从进化树结果上看,大口黑鲈的PI3KR1基因的氨基酸序列与深裂眶锯雀鲷和大黄鱼亲缘性较近,与哺乳动物的亲缘性较远。2、AKT1基因全长为3672 bp,其中5′端非编码区346 bp,开放阅读框1422bp,3′端非编码区1904 bp,共编码473个氨基酸。克隆所得大口黑鲈AKT1基因与大黄鱼的AKT1基因相似度较高。从进化树结果上看,大口黑鲈的AKT1基因的氨基酸序列与欧洲鲈和大黄鱼亲缘性较近,与哺乳动物的亲缘性较远。研究二:试验饲料中添加白藜芦醇(Resveratrol,RSV)的水平对大口黑鲈(初重33.76±0.12g)的生长性能、肝糖原积累、糖代谢和非特异性免疫的影响。分别以5%淀粉和10%淀粉配制两种等氮等脂饲料,作为正对照(LC)和负对照(HC)。在负对照组的基础上,梯度添加0.05%,0.10%,0.25%和0.50%的白藜芦醇。试验用鱼禁食24小时后,挑选大小相近活力强劲的初始体重为33.76±0.12g的鱼随机分配到18个鱼缸(水量为800L)中作为试验用鱼,每个鱼缸30尾鱼。每天上午8点和下午4点用上述饲料饱食投喂两次,养殖试验进行9周。试验期间,养殖系统的循环水经过物理过滤后再经紫外消毒。水温保持在27±1℃,p H 7.2±0.2,采用自然光照。研究结果如下:1、白藜芦醇的添加对试验鱼的生长、体组成和饲料利用的影响。各处理组间大口黑鲈的存活率无显著差异(P>0.05)。与低糖饲料(LC)组相比,高糖饲料(HC)降低了试验鱼的特定生长率,但影响并不显著(P>0.05)。高糖饲料的摄入显著提高了大口黑鲈的肝体比,但白藜芦醇的添加则明显降低了高糖饲料诱导的肝体比的升高(P<0.05)。饲料糖水平的升高对大口黑鲈的脏体比没有显著影响(P>0.05);与HC处理组相比,白藜芦醇的添加降低了高糖饲料大口黑鲈的脏体比(P>0.05),且0.25%白藜芦醇处理组大口黑鲈脏体比显著低于0.50%白藜芦醇处理组(P<0.05)。各处理组间大口黑鲈肥满度没有显著性差异(P>0.05)。高糖饲料的摄入显著降低了试验鱼的摄食率(P<0.05),而白藜芦醇的添加对其摄食率没有显著影响(P>0.05)。高糖饲料组的大口黑鲈的饲料效率和蛋白质蛋白质效率显著高于低糖组(P<0.05)。白藜芦醇的添加对上述两个指标没有显著影响(P>0.05)。各处理组间大口黑鲈的全鱼体组成、肌肉成分和肝脏水分均无显著差异(P>0.05)。0.10%白藜芦醇处理组显著提高了高糖饲料组的大口黑鲈的肝脏蛋白质含量(P<0.05);0.25%和0.50%白藜芦醇处理组的大口黑鲈的肝脏脂肪含量显著高于0.10%白藜芦醇处理组(P<0.05)。HC组大口黑鲈的肝糖原和肌糖原含量均显著高于LC组(P<0.05),白藜芦醇的添加显著降低了高糖饲料诱导的大口黑鲈肝糖原和肌糖原累积(P<0.05)。2、白藜芦醇的添加对试验鱼的餐后血糖、胰岛素信号通路、糖代谢相关基因表达影响在餐后24小时,各处理组间大口黑鲈血糖含量无显著差异(P>0.05)。在餐后0、1、3、6、12时间点,白藜芦醇的添加均能显著降低高糖饲料诱导的大口黑鲈的血糖含量升高(P<0.05)。饲料糖水平的升高显著降低了SIRT1的表达,而0.10%和0.25%的白藜芦醇的添加显著地提高了该基因的表达(P<0.05)。各处理组间大口黑鲈胰岛素受体(IR)的表达无显著差异(P>0.05)。HC组大口黑鲈磷脂酰肌醇-3-激酶p85(PI3KR1)的表达量显著低于LC组(P<0.05),白藜芦醇的添加对其表达没有造成显著影响(P>0.05)。饲料糖水平的升高对大口黑鲈蛋白激酶B1(AKT1)的表达影响不显著(P>0.05),但是0.10%和0.25%白藜芦醇处理组大口黑鲈蛋白激酶B1(AKT1)的表达相比HC组显著升高(P<0.05)。高糖饲料显著提高了大口黑鲈叉头转录因子O1(FOXO1)的表达(P<0.05),白藜芦醇的添加则显著降低了该基因的表达(P<0.05)。与HC组相比,白藜芦醇的添加显著提高了大口黑鲈葡萄糖激酶(GK)和6-磷酸果糖激酶(PFKL)的表达(P<0.05)。大口黑鲈的丙酮酸激酶(PK)的表达在各处理组没有显著差异(P<0.05)。高糖饲料并未显著影响糖异生相关基因葡萄糖-6-磷酸催化亚基(G6PC)、果糖-1,6-二磷酸酶-1(FBP1)和磷酸烯醇式丙酮酸羟基酶(PEPCK)的表达(P>0.05)。0.25%和0.50%白藜芦醇处理组显著降低了高糖饲料诱导的大口黑鲈的葡萄糖-6-磷酸催化亚基(G6PC)的表达的升高(P<0.05)。与HC组相比,白藜芦醇的添加显著提高了果糖-1,6-二磷酸酶-1(FBP1)和磷酸烯醇式丙酮酸羟基酶(PEPCK)的表达(P<0.05)。3、白藜芦醇的添加对试验鱼非特异性免疫的影响饲料糖水平的升高显著降低了大口黑鲈血清和肝脏中的溶菌酶含量(P<0.05),白藜芦醇的添加能显著提高溶菌酶含量的降低(P<0.05)。各处理组大口黑鲈血清补体C3、C4和肝脏补体C3的含量没有显著差异(P>0.05);高糖饲料的摄入显著提高了肝脏中C4的含量(P<0.05),0.25%和0.50%白藜芦醇处理组显著降低了高糖饲料导致的肝脏中C4含量升高(P<0.05)。各处理组间大口黑鲈Rel A的表达没有显著差异(P>0.05)。大口黑鲈白细胞介素1β(IL-1β)的表达没有受到饲料糖水平的影响;与HC组相比,白藜芦醇的添加显著降低了白细胞介素-1β(IL-1β)的表达(P<0.05)。高糖饲料的摄入显著提高了大口黑鲈肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达(P<0.05)。饲料糖水平的升高对大口黑鲈白介素10(IL-10)和转化生长因子β(TGF-β)的表达没有显著影响(P>0.05),白藜芦醇的添加显著促进了IL-10和TGF-β的表达(P<0.05)。
其他文献
乙烯(C2H4)是衡量国家石油化工水平的标志,在国民经济中占有重要地位。乙炔(C2H2)选择性加氢催化剂的开发是整个乙烯精制工艺中最核心的技术。目前,以Pd为活性组分的催化剂由于其优良的活性与稳定性在工业应用中占据主导地位。然而,Pd催化剂仍存在价格昂贵以及对乙烯的选择性差的问题,常需加入助催化剂对其进行改性。此外,随着计算材料科学的不断发展,基于密度泛函理论(DFT)的模拟计算可为新材料的设计及
学位
近年来,自动驾驶环境感知技术在智能驾驶领域飞速发展,旨在负责感知汽车周围环境目标。基于视觉的多目标检测和跟踪技术是环境感知模块中非常关键的一部分,尽管国内外研究人员在该领域取得不错成绩,但是在交通道路环境下仍存在感兴趣目标遮挡、目标较小等问题。目前流行的多目标跟踪算法是基于检测来跟踪(Tracking by Detection,TBD)的范式,即用目标检测算法找到待跟踪目标,再对多个目标进行跟踪。
学位
农民专业合作社立足于规模化的优势,由农民自愿联合,向广大农户提供技术支持、资金借贷、农资采购、经营管理及加工销售等服务的新型农民合作经济组织。自2007年《农民专业合作社法》颁布和实施以来,我国农民专业合作社的数量呈现快速增长的趋势,作为一级农村经济组织,农民专业合作社在帮助农民实现增收致富方面发挥着越来越重要的作用。2015年《中共中央国务院关于打赢脱贫攻坚战的决定》提出:把扶贫工作作为实现第一
学位
中国西部高海拔地区存在着许多隧道,其周围大气压力低于正常值。高海拔公路隧道较低的环境压力是影响隧道火灾烟气输运及气体组分分布的关键参数。竖井自然排烟是隧道烟气经济、实用、有效的治理方法,因此明确高海拔低压环境边界条件下竖井自然排烟隧道内烟气特性的变化规律对于解决现阶段高海拔隧道火灾安全问题而言不可或缺。本文针对低压环境下竖井自然排烟隧道内烟气运动、温度分布及气体组分分布进行理论分析及数值模拟,主要
学位
基于生态系统的海洋综合管理起源于上个世纪八十年代,随着时间的推移不断发展,该理念已经成为目前全球大型海洋生态系统管理的重要理念。国内外学者也对该理念进行了许多研究,主要包括解释该理念的内涵、阐述了基本特征、提出了落实该理念的原则、分析了该理念的管理目标等方面。但因该理念涉及生态学、政策学、资源学、海洋科学等多个学科,学术界对其理念内涵、原则等有诸多不同的见解。此外,目前主要研究并未或极少涉及到实证
学位
阿尔兹海默症(Alzheimer’s Disease,AD)又称老年痴呆症,是世界六大死亡原因之一。随着老龄化人口的逐渐增加,阿尔兹海默症带来的问题也会变得越来越突出,对家庭和社会带来极大的负担。阿尔兹海默症病情的发展主要是两个阶段,痴呆前阶段和痴呆阶段。在痴呆阶段,主要分为轻度认知障碍(MCI)和阿尔兹海默症(AD)这两个阶段。由于阿尔兹海默症多发于中老年群体且病情发展缓慢,大众缺乏对阿尔兹海默
学位
目前我国城乡基础设施建设和居民经济水平有较大差距,农村地区存在发展慢,养老服务体系基础较为薄弱的问题,导致农村养老形势相较城市更严峻。农村老人的养老问题涉及方面多,解决难度大,由于岁数渐长,身体机能退化,逐渐失去劳动能力,子女大多数都外出工作,再加上孝文化观念淡薄,当下已成为部分农村社会问题的引发根源。本文针对获嘉县的农村老人养老现状,通过设计获嘉县农村老人在经济、精神、健康、养老意愿以及社会支持
学位
农业现代化是传统农业逐步向现代农业转变的持续发展的过程,是解决我国“三农”问题的好办法。为更准确的把握海西州地区农牧业现代化的发展情况,有针对性的加快海西州农牧业现代化进程,需要运用科学的方法,定量地分析海西州农牧业现代化现状,评估其发展程度,找到制约海西州农牧业发展的各种因素。本文基于目前农牧业现代化发展水平的评价研究,并根据海西州农牧业的具体发展现况,通过构建海西州农牧业现代化发展水平评价体系
学位
镉(Cd)污染土壤的修复是环境领域的热点和难点。综合化学淋洗技术和钝化技术的优缺点,本研究提出用淋洗与钝化结合的方法修复高浓度镉污染土壤,可极大降低残留镉的环境风险和提高土壤质量。以FeCl3、柠檬酸(CA)和谷氨酸二乙酸四钠(GLDA)为淋洗剂,探究了不同淋洗剂浓度、液固比和时间等条件对其淋洗效率的影响;分析了FeCl3/CA/GLDA淋洗分别结合凹凸棒土(AT)/稻谷壳生物炭(RHB)/石灰(
学位
农村集体经济作为社会主义公有制在农村的主要表现形式,是解决农村经济社会发展不平衡不充分问题、实现共同富裕的物质基础。改革开放以后,农村形成了以家庭联产承包责任制为基础、统分结合的双层经营制度。由于对“统分”关系认识不足,过度重视“分”的作用,而忽视了“统”的作用,在一段时期内使得农村集体经济不断衰弱,甚至许多村农村集体经济组织没有任何收入,形成了经济上的“空壳村”。为了使农村集体经济的作用更好发挥
学位