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炎症性肠病(Inflammatory bowel disease,IBD)对人类健康构成了严重威胁,易导致长期营养素吸收不良、腹痛和直肠出血。遗传易感性和环境因素均会导致IBD的发病。通过改变肠道菌群,饮食模式也会影响结肠炎症的发病。高脂肪和高糖饮食均可增加IBD的患病率。相反,饮食中水果和蔬菜的摄入与IBD风险降低相关。而最常见的IBD治疗药物如5-氨基水杨酸酯和免疫调节剂已显示出严重的副作用。因此,饮食干预或许可作为治疗IBD的一个新靶点。茶叶含有多酚、氨基酸、生物碱等活性成分。已有研究表明茶叶在治疗炎症疾病、调节肠道微生物方面具有良好的效果。由于加工方法的差异,茶叶可以分为包括绿茶、白茶、黄茶、乌龙茶、红茶、黑茶在内的六大类茶。由其加工方法和原料品种的差异导致了其内含生化成分具有不同程度的差异,因为使不同茶类具有不同的生理功能。重庆地区特色农产品—老鹰茶—含有较高含量的黄酮类物质,具有抗炎、护肝等生理活性。目前,已有研究表明绿茶和红茶对IBD有较好的缓解作用,而其他四类茶和老鹰茶对IBD的作用尚未有报道。同时,基于肠道微生物在IBD发病及治疗中的重要作用,茶叶对IBD患病个体的肠道微生物的调节作用也值得进一步研究。本文研究了六大类茶和老鹰茶对葡聚糖硫酸钠盐(Dextran sulphate sodium,DSS)诱导的小鼠结肠炎的缓解作用和对其肠道微生物的调节作用。同时,基于粪便微生物移植方法,探究了经过绿茶和黑茶在小鼠体内调节的肠道微生物对于小鼠结肠炎的缓解作用。主要结果如下:1、以热水浸提法制备了绿茶(Green tea extract,GTE)、白茶(White tea extract,WTE)、黄茶(Yellow tea extract,YTE)、乌龙茶(Oolong tea extract,OTE)、红茶(Black tea extract,BTE)、黑茶(Dark tea extract,DTE)、老鹰茶(Hawk tea extract,HTE)提取物。通过高效液相色谱测定了这七种茶提取物的多酚、黄酮醇及其苷类、氨基酸、生物碱的成分。结果表明,GTE中的多酚组分和氨基酸组分含量最高,HTE中的黄酮醇及其苷类含量最高。而DTE中的没食子酸含量最高。2、体外细胞实验表明,七大类茶提取物对脂多糖诱导的巨噬细胞炎症模型具有较好的抗炎效果。茶提取物(Tea extract,TE)显著抑制了促炎细胞因子(Interleukin(IL)-6、IL-12、肿瘤坏死因子-α)和活性氧的表达量而增加了抑炎细胞因子IL-10的表达量。3、体内动物实验表明,七大类茶提取物缓解了小鼠体重降低和结肠缩短;通过降低促炎细胞因子和髓过氧化物酶活性,提高抑炎细胞因子水平而缓解了小鼠肠道炎症;通过减少DSS导致的紧密连接蛋白ZO-1和occludin缺失而维持了小鼠肠道完整性;缓解了因DSS导致的肝肾损伤。同时,TE显著抑制了核因子-κB的活化与转运,这可能与茶提取物的抗结肠炎活性有关。TE能够通过增加潜在有益细菌(例如Faecalibaculum和Bifidobacterium)的丰度,并减少潜在有害细菌(例如Bacteroids和Mucispirillum)的丰度,对肠道产生益生元作用。TE可恢复结肠炎小鼠粪便中短链脂肪酸产量的降低。在以上实验中,GTE和DTE均表现出优于其他TE的效果。4、分别连续给予三组小鼠饮用水、GTE、DTE灌胃一个月,以培养粪菌移植(FMT)供体。结果表明,长期给予小鼠GTE和DTE对小鼠没有产生明显的毒性作用;GTE和DTE因其生化成分的巨大差异而对肠道微生物表现出了不同的调节作用。但总的来看,相对于灌胃饮用水,灌胃GTE和DTE提高了有益菌的相对丰度(例如Lactococcus和Akkermansia),且抑制了潜在的有害菌的相对丰度(例如Turicibacter和Parasutterella)。因此,从肠道微生物的组成来看,GTE和DTE调节的肠道微生物可能对结肠炎产生缓解作用。5、将FMT供体的粪便微生物移植给DSS诱导的结肠炎小鼠。来自普通饮水、GTE、DTE小鼠的粪便微生物均表现出了对DSS诱导的小鼠结肠炎的缓解效果。其中,相对于普通饮水小鼠的粪便微生物,移植GTE和DTE小鼠的粪便微生物给结肠炎小鼠显著缓解了了小鼠体重的降低、促炎细胞因子(IL-1β和TNF-α)的升高、杯状细胞的损失,且提高了抑炎细胞因子IL-10的表达量、紧密连接蛋白ZO-1和粘蛋白2的表达量。从肠道微生物成分上分析,Normal组小鼠的粪菌降低了潜在有害菌Bacteroides和Parasutterella的相对丰度;而GTE组小鼠的粪菌显著提高了益生菌Akkermansia,降低了潜在有害菌Desulfovibrio、Lachnoclostridium、Bacteroides uniformis、Alistipes finegoldii的相对丰度;而DTE显著增加了潜在益生菌Bifidobacterium,降低了潜在有害菌Bacteroides、Lachnoclostridium、Alistipes finegoldii的相对丰度。相对于Normal组小鼠,来自GTE和DTE组小鼠的粪菌在更大程度上可以增加DSS结肠炎小鼠体内潜在益生菌丰度,而更多地降低DSS结肠炎小鼠体内潜在有害菌丰度。这可能是GTE和DTE组小鼠粪菌的移植的抗结肠炎效果优于Normal组小鼠粪菌的原因。相对于来自Normal组小鼠的粪菌,来自GTE和DTE组小鼠的粪菌显著抑制了TLR4/MyD88/NF-κB通路的上调,这可能是FMT作用的分子机制之一。