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内生真菌是指那些在其生活史中的某一段时期生活在植物组织内,对植物组织没有引起明显病害症状的真菌。近年来的研究表明,内生真菌可以产生与宿主相同或相似的代谢产物。此特性使植物内生真菌成为从中寻找结构新颖、活性专一的重要化合物的新资源。由此,本课题选择了银杏Ginkgo biloba L.和厚朴Magnolia officinalis Rehd. et Wils.为代表材料,开展了两种植物内生真菌的微生物学研究;银杏中具内酯活性的菌株筛选研究;厚朴中具抑菌活性的菌株筛选研究;厚朴中活性菌株的物质基础研究等工作。 从四个不同来源的银杏根及茎中,共分离出178株内生真菌,经形态观察鉴定为1纲、4目、6科、28属。在目的分类水平上以丛梗孢目(Moniliales)为优势种群;在属的分类水平上以镰孢属(Fusarium)、曲霉属(Aspergillus)、枝孢属(Cladosporium)为优势种群。实验发现,银杏不同部位的内生真菌数量及种类分布差异较大,不同来源的银杏也有类似情况。体现出银杏内生真菌的多样性、组织专一性。就上述178株真菌发酵液进行内酯类物质TLC检测,发现36株与银杏内酯C斑点颜色一致,R_f值接近.将这36株发酵液进行抑制血小板聚集实验,发现有14株能够有效抑制ADP引起的血小板聚集,其中的7株被认为能够产生银杏内酯C或其结构类似物。 首次从两个不同来源的厚朴茎中分离出48株内生真菌,经形态观察鉴定为1纲、3目、6科、16属。在目的分类水平上以丛梗孢目(Moniliales)为优势种群;在属的分类水平上以曲霉属(Aspergillus)、青霉属(Penicillium)和镰孢属(Fusarium)为优势种群。不同来源的厚朴内生真菌数量及种类分布差异较大。就上述内生真菌中的27株进行厚朴酚、和厚朴酚HPLC检测,发现17株真菌菌丝或发酵液中含有厚朴酚、和厚朴酚或其结构类似物。另将27株真菌的发酵液进行金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)3种人类病原细菌的抑菌实验,结果表明其中的7株真菌发酵液对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)有不同程度的抑制作用,用不同培养基进行复筛后,选择抑菌作用较强的FM044进行抑菌活性物质基础研究。从中分离出一种白色晶体,经IR、MS、~1H-NMR波谱分析鉴定为D-甘露醇(mannitol)。抑菌活性物质基础研究仍在进行。