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背景：
创伤性凝血病(Trauma-induced coagulopathy, TIC)发生在严重创伤的早期，是导致创伤后死亡的主要原因。我们之前的研究发现不同类型的创伤导致的TIC在创伤早期(~3h)均出现血小板功能障碍；而血小板花生四烯酸(Arachidonic acid, AA)依赖性激活途径的抑制对多发伤(Multiple injury, MI)导致的TIC似乎具有特异性。本实验旨在进一步研究大鼠MI导致的TIC模型中血小板AA依赖性激活途径的抑制作用，并探讨其可能的机制。
方法：
将46只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为两组：对照组和MI组。对照组仅行气管插管及颈动脉插管；MI组在气管插管及颈动脉插管的基础上，通过行右侧股骨骨折、双下肢骨骼肌挤压伤、小肠挤压伤、肝脏挤压伤建立MI模型。在插管或造模3h后采集全血。采用血栓弹力图仪(Thrombelastography, TEG)来检测血小板功能，以评估AA激活途径的抑制程度。制备血小板血浆，用流式细胞仪(Flow cytometry, FCM)检测血小板活化依赖颗粒蛋白P-选择素(P-selectin, CD62P)的表达。采用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA)检测体外外源性AA加入血小板血浆前后的血浆中血栓素B2(Thromboxane B2, TXB2 )、6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-prostaglandinF1alpha,6-Keto-PGF1α)和前列腺素E2(Prostaglandin E2, PGE2)的水平。
结果：
MI组的最大血凝块强度(Maximum amplitude, MA)较对照组显著降低(68.5±2.6mmvs.75.3±0.7mm,P=0.0374)。MI组血小板AA依赖性激活途径的抑制率明显高于对照组(分别为47.9％±5.0％和23.2％±6.4％，P=0.0167)。经AA处理的血小板血浆中，MI组的CD62P表达率明显低于对照组(median，5.0％[IQR,4.7%-8.2%]vs.12.1％[IQR,9.7%-42.9%]；P=0.0156)。MI组的血浆6-Keto-PGF1α浓度明显高于对照组(711.9±42.8pg/mLvs.409.9±54.8pg/mL,P=0.0004)。MI组的血浆PGE2浓度较对照组升高(258.8±28.4pg/mLvs.148.6±31.5pg/mL,P=0.0220)。而两组之间的血浆TXB2浓度无显著性差异(1265.0±196.4pg/mLvs.919.3±137.0pg/mL，P=0.1663)。
结论：
多发伤导致的TIC早期可观察到血小板激活抑制，可能与AA依赖性激活途径功能障碍有关，血浆中AA代谢产物PGI2和PGE2水平的升高可能参与了此抑制过程。
创伤性凝血病(Trauma-induced coagulopathy, TIC)发生在严重创伤的早期，是导致创伤后死亡的主要原因。我们之前的研究发现不同类型的创伤导致的TIC在创伤早期(~3h)均出现血小板功能障碍；而血小板花生四烯酸(Arachidonic acid, AA)依赖性激活途径的抑制对多发伤(Multiple injury, MI)导致的TIC似乎具有特异性。本实验旨在进一步研究大鼠MI导致的TIC模型中血小板AA依赖性激活途径的抑制作用，并探讨其可能的机制。
方法：
将46只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为两组：对照组和MI组。对照组仅行气管插管及颈动脉插管；MI组在气管插管及颈动脉插管的基础上，通过行右侧股骨骨折、双下肢骨骼肌挤压伤、小肠挤压伤、肝脏挤压伤建立MI模型。在插管或造模3h后采集全血。采用血栓弹力图仪(Thrombelastography, TEG)来检测血小板功能，以评估AA激活途径的抑制程度。制备血小板血浆，用流式细胞仪(Flow cytometry, FCM)检测血小板活化依赖颗粒蛋白P-选择素(P-selectin, CD62P)的表达。采用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA)检测体外外源性AA加入血小板血浆前后的血浆中血栓素B2(Thromboxane B2, TXB2 )、6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-prostaglandinF1alpha,6-Keto-PGF1α)和前列腺素E2(Prostaglandin E2, PGE2)的水平。
结果：
MI组的最大血凝块强度(Maximum amplitude, MA)较对照组显著降低(68.5±2.6mmvs.75.3±0.7mm,P=0.0374)。MI组血小板AA依赖性激活途径的抑制率明显高于对照组(分别为47.9％±5.0％和23.2％±6.4％，P=0.0167)。经AA处理的血小板血浆中，MI组的CD62P表达率明显低于对照组(median，5.0％[IQR,4.7%-8.2%]vs.12.1％[IQR,9.7%-42.9%]；P=0.0156)。MI组的血浆6-Keto-PGF1α浓度明显高于对照组(711.9±42.8pg/mLvs.409.9±54.8pg/mL,P=0.0004)。MI组的血浆PGE2浓度较对照组升高(258.8±28.4pg/mLvs.148.6±31.5pg/mL,P=0.0220)。而两组之间的血浆TXB2浓度无显著性差异(1265.0±196.4pg/mLvs.919.3±137.0pg/mL，P=0.1663)。
结论：
多发伤导致的TIC早期可观察到血小板激活抑制，可能与AA依赖性激活途径功能障碍有关，血浆中AA代谢产物PGI2和PGE2水平的升高可能参与了此抑制过程。