Bcl-2 siRNA上调胃腺癌细胞对5-Fu化疗药物敏感性的影响

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目的:观察Bcl-2 siRNA对胃腺癌细胞增殖的影响,并探讨Bcl-2 siRNA治疗胃腺癌对5-FU药物敏感性的影响。方法:设空白对照组、阴性转染组、Bcl-2转染组;采用siRNA转染技术特异性“沉默”SGC-7901胃腺癌细胞株中Bcl-2基因的表达;分别用RT-PCR及Western blot检测siRNA-Bcl-2转染前后mRNA及蛋白水平的“沉默”效率;用四甲基偶氮唑盐光吸收法(MTT法)检测胃腺癌细胞增殖抑制率;碘化丙啶(PI)单染和流式细胞仪技术检测细胞凋亡率。结果:(1)通过siRNA转染技术,Bcl-2基因的mRNA转录表达被特异性的“沉默”;(2)利用siRNA转染技术特异性“沉默”Bcl-2基因,可以有效的抑制Bcl-2的蛋白表达;(3)不同剂量5-FU(15、150、1500、15000mg/L)治疗转染组、阴性转染组、空白对照组24h,Bcl-2转染组的细胞增殖抑制率明显高于阴性转染组和空白对照组(P<0.05);(4)Bcl-2转染组较阴性转染组和空白对照组的细胞凋亡率显著增加(P<0.05);Bcl-2 siRNA联合5-FU化疗药物治疗时,Bcl-2转染组较阴性转染组和空白对照组的细胞凋亡率也显著增加(P<0.05)。结论:(1)胃腺癌SGC-7901细胞株中,利用siRNA技术可以“沉默”Bcl-2基因的表达,可以抑制Bcl-2蛋白的表达;(2)有效抑制胃腺癌细胞增殖;(3)增加了胃腺癌细胞对5-FU化疗药物的敏感性和胃腺癌细胞的自发性凋亡。
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