目的1:验证McA-RH7777细胞在大鼠肝脏原位移植制造肝癌模型的可行性。2:探讨新型高频方波电脉冲在大鼠肝癌治疗中的消融机制及应用疗效,为探索肿瘤消融治疗的新方法提供依据。方法肝癌McA-RH7777细胞体外培养制备肿瘤种植悬液,清洁级SD大鼠经肝内注射法建立肝癌模型。建模后1周,随机选取40只模型鼠分为实验组(n=26)和对照组(n=14)。实验组大鼠肝脏肿瘤在2000V/cm场强下接受电脉冲处理,对照组脉冲场强为OV/cm。监测两组大鼠治疗前3d、1d及治疗后1d、7d、14d、21d、30d的血清生化指标、心肌酶谱及肿瘤标志物AFP水平变化,分别记录两组大鼠移植瘤术前1d、术后7d、14d、21d肿瘤长径变化、计算肿瘤体积和术后60d生存时间改变,记录治疗过程中相关性并发症情况,术后30d分别随机处死实验组和对照组各2只大鼠,检测两组消融靶区肿瘤组织Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平,并切取肿瘤消融区域行HE染色、TUNEL染色及KI67、VEGF免疫组化观察组织形态学改变、细胞凋亡率及细胞增殖率。结果实验组血清谷丙转氨酶及谷草转氨酶均在术后1d一过性升高,之后呈持续下降趋势,术后21d接近正常水平,对照组均呈持续增长的趋势。实验组与对照组肌酐、尿素氮在实验前后均未见明显异常,各时间点两组间也无差异。血清磷酸激酶及LDH在术后1d有一过性增高,后呈持续下降趋势,各时间点两组间无明显差异。实验组肿瘤标志物AFP在术后1d达顶峰,呈持续下降趋势,术后14d达正常值,对照组AFP持续升高,术后7d两组开始呈现出差异,且差异有统计学意义。Western印记法检测结果显示,实验组术后Caspase-3、Bax表达水平较对照组增高,Bcl-2表达水平较对照组下降。实验组术前1d、术后7d、14d、21d的肿瘤长径分别为(11.2±3.1、8.1±2.3、5.3±1.6、3.5±1.1)mm,经计算得出肿瘤体积分别为(301.8±243.0、139.7±128.1、45.0±39.5、13.5± 12.5)mm3。总体呈持续下降的趋势,而对照组各时间点的肿瘤长径分别为(9.8±2.1、14.1±2.7、17.8±3.7、14.4±2.7)mm。计算可得出体积分别为(267.6±192.6、736.3±391.9、1488.8±671.7、901.3±428.0)mm3,呈持续上降趋势,术后14d达到最大值,术后21d略有下降。实验组术后移植瘤HE染色可见大量凋亡、坏死区,与正常组织边界清晰,坏死区域有碎裂细胞及炎症细胞,管道系统保持完整,未见明显破坏。VEGF免疫组化可见实验组蓝染细胞数量明显少于对照组,TUNEL染色结果可见实验组强染色,而对照组呈弱染色或不染色,实验组凋亡率为76.85±10.27%,对照组凋亡率为2.56±1.67%。实验组KI67少量黄染(1+,弱染色),细胞增殖比率为2.8±0.8%。而对照组显示大量棕黄色深染(4+,强染色),细胞增殖率为43.1 ±3.8%。结论1:直接注射法制备McA-RH7777细胞肝脏肿瘤模型成瘤率高,成本低,是一种十分简单、可靠的肝癌模型制备方法。2:新型高频方波电脉冲可有效控制大鼠肝癌的局部进展,有效保护正常血管组织,且具有良好的安全性和有效性。3:新型高频方波脉冲可有效减少肌肉收缩、心率失常等并发症。