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目的:将单味中草药山姜用作饲用添加剂,联合益生芽孢杆菌剂饲喂小鼠,观察对小鼠免疫功能和肠道菌群的影响。为研制益生素联合中草药型饲用添加剂提供试验依据。方法:制得生药浓度为1g/mL的山姜煎煮液和乙醇粗提液,用试管连续二倍稀释法和管碟法分别测定其对芽胞杆菌最低抑菌浓度(MIC)和抑菌圈直径,以确定山姜混合芽孢杆菌用作饲用添加剂的可行性。将全雄昆明小鼠140只随机分成C(空白对照组)、A(山姜组)、Bc(蜡样芽胞杆菌组)、Bs(枯草芽胞杆菌组)、Ac(山姜+蜡样芽胞杆菌组)、As(山姜+枯草芽胞杆菌组)和At(土霉素对照组)七组,C组以普通饲料喂养,其它各组以制备料喂养。A组、Ac组和As组添加2%山姜细粉。Bc组和Bs组分别添加2.0×10~6cfu/g蜡样芽胞杆菌剂和枯草芽胞杆菌剂。At组添加1‰饲用土霉素钙散粉剂。各组分笼饲养,自由饮水,定时定量饲喂。饲养至10天、20天和30天时,早饲前空腹称重,计算各组平均体增重;每组随机采样5只,剖杀,摘取脾脏、胸腺测定免疫器官指数;并取脾脏和胸腺,石蜡切片,HE染色,镜检观测组织学变化。于第30天,无菌操作制得脾细胞悬液,用MTT法作T淋巴细胞增殖试验。于第30天,眼眶取血,制得血清,测定血清溶菌酶活性。于第30天,采取回肠内容物1g,作肠道菌群定量检测。结果:1.生药浓度为1g/ml的山姜煎煮液和乙醇浸提液在体外对蜡样芽孢杆菌PAS38菌株、枯草芽孢杆菌Pab04菌株和ETEC均无抑菌效果。与硫酸庆大霉素作抑菌圈直径大小比较,差异极显著,而与生理盐水比较差异不显著。2.A组、Ac组和As组体增重显著高于C组和At组(p<0.01),且与Bc组、Bs组差异显著(p<0.05)。A组、Ac组和As组组间差异不显著(p>0.05)。3.Bc组、Bs组T淋巴细胞增殖大于C组、At组和A组(p<0.01),与Ac组和As组比较,差异显著(p<0.05)。血清溶菌酶活性测定结果,Bc组和Bs组均高于C组、At组和A组(p<0.05),与Ac组和As组比较,差异显著(p<0.05)。4.Bc组、Bs组、Ac组和As组肠道双歧杆菌和乳酸杆菌含量高于C组和At组(p<0.05),肠球菌含量均低于C组和At组(p<0.05)。At的双歧杆菌、乳酸杆菌和肠杆菌较其它各组含量下降,而肠球菌含量明显高于其它各组(p<0.01)。5.Bc组和Bs组胸腺皮髓质区域分界明显,皮质和髓质细胞密度较C组、At组和A组高。At组胸腺皮髓质分界模糊,淋巴细胞密度低。Bc组和Bs组脾脏与空白组和抗生素组作比较,白髓区域明显扩大,淋巴小结增多,动脉淋巴鞘周围细胞密度增高幅度大,生发中心明显,而与Ac组和As组比较组织学变化不明显。结论:1.1g/ml的山姜粗提液在体外对芽胞杆菌没有抑菌作用。2.芽胞杆菌能促进小鼠免疫器官发育和成熟,并能明显促进ConA诱导的脾T淋巴细胞增殖和提高血清溶菌酶活性,对小鼠免疫功能有促进作用。3.山姜对小鼠体增重有明显促进作用,而对小鼠免疫功能没有明显影响。4.山姜联合芽胞杆菌,更有利于芽胞杆菌在肠道定植的生境改变,协同芽孢杆菌促使肠道优势菌群形成,调节肠道微生态平衡,并对小鼠免疫功能有一定促进作用。