背景:支气管哮喘,简称哮喘,以慢性气道炎症、气道高反应性及粘液分泌增多为特征。发病机制复杂,研究证实,IL-17A、IL-17F均参与哮喘气道炎症病理过程,二者可形成同源、异源二聚体,与受体IL-17RA、IL-17RC复合物相互作用,介导下游信号转导。近年来,IL-17RA及其信号转导通路研究较多,IL-17RC在IL-17下游信号传导中的确切机制尚不清楚。我们设想,若可以体内免疫IL-17RC可溶性蛋白,内源性抑制或者阻断IL-17下游信号转导通路,对缓解哮喘气道炎症具有重要意义。壳聚糖（chitosan,CS）是一种有效的黏膜输送载体,无致病性,并且具有免疫调节功能。本实验在前期成功构建原核表达体系p ET28a（+）/m IL-17RC BL21（DE3）,可诱导其产生可溶性蛋白IL-17RC的基础上,拟构建CS-IL17RC纳米颗粒,通过鼻粘膜接种小鼠,研究其对哮喘气道炎症的影响。目的:构建CS-IL17RC纳米颗粒,阻断IL-17下游信号转导,并观察其对哮喘气道炎症的影响。方法:本实验拟分四步进行:（1）CS-IL17RC纳米颗粒的构建:利用构建好的原核表达体系p ET28a（+）/m IL-17RC BL21（DE3）,诱导表达重组蛋白IL-17RC,经Western blot鉴定后,应用离子交联法制备CS-IL17RC纳米颗粒,并测定其物理性能。（2）经鼻粘膜接种CS-IL17RC纳米颗粒、CS纳米颗粒、IL-17RC或PBS,检测小鼠血清ALT/GPT、AST/GOT及BUN水平,HE染色观察小鼠不同内脏器官病理学改变。（3）CS-IL17RC纳米颗粒鼻粘膜接种哮喘小鼠后剂量探索:复制小鼠哮喘模型,以不同剂量的CS-IL17RC纳米颗粒鼻腔粘膜干预小鼠,ELISA法测定肺泡灌洗液（BALF）中细胞因子IL-4、IL-17、IL-17F、IFN-γ浓度,实时荧光定量PCR法测定小鼠肺组织中IL-17RC m RNA的表达水平,HE及PAS染色观察小鼠肺组织病理变化,从而探索最佳干预剂量。（4）CS-IL17RC纳米颗粒对哮喘小鼠气道炎症的影响:复制小鼠哮喘模型,鼻粘膜接种CS-IL17RC纳米颗粒、CS纳米颗粒、IL-17RC或PBS,采用ELISA法测定BALF中细胞因子及趋化因子浓度,实时荧光定量PCR法测定肺组织中Act1,TRAF6,NFκBp65m RNA表达水平,HE、PAS染色分析肺组织病理变化,流式细胞术分析脾脏中Th细胞亚群分类情况。结果:（1）p ET28a（+）/m IL-17RC BL21（DE3）原核表达体系,经菌落PCR鉴定其含有目的基因片段,Western blot鉴定其成功表达重组蛋白,并采用离子交联法成功构建了CS-IL17RC纳米颗粒,物理性能符合实验要求。（2）与PBS组相比,CS组、IL-17RC组及CS-IL17RC纳米颗粒组小鼠血清ALT/GPT、AST/GOT、BUN水平略有改变,差异无统计学意义,肝脏、肾脏、脾脏的HE染色未见明显病理改变。（3）哮喘小鼠经鼻粘膜干预不同剂量CS-IL17RC纳米颗粒,结果提示,CS-IL17RC 40ug干预组抑制小鼠气道炎症细胞浸润及粘液分泌明显,并可降低BALF中IL-4、IL-17、IL-17F及肺组织中IL-17RC m RNA的表达水平。（4）CS-IL17RC纳米颗粒经鼻粘膜干预哮喘小鼠,降低BALF中细胞因子IL-4、IL-6、IL-23、IL-17、IL-17F及趋化因子MIP-1α、MIP-2表达水平,下调肺组织中Act1、NFκBp65、TRAF6 m RNA的表达;流式细胞术结果显示,CS-IL17RC纳米颗粒促进小鼠IFN-γ+Th1细胞表达,抑制IL-4+Th2、IL-17+Th17细胞表达;肺组织病理结果显示,CS-IL17RC纳米颗粒干预,可有效减轻气道炎症细胞浸润及粘液分泌。结论:（1）成功构建了CS-IL17RC纳米颗粒。（2）CS-IL17RC纳米颗粒经鼻腔粘膜接种具备生物安全性。（3）CS-IL17RC纳米颗粒对哮喘小鼠的最佳干预剂量为40ug。（4）CS-IL17RC纳米颗粒经鼻粘膜干预哮喘小鼠后,可减轻气道炎症反应。