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宿主对朊毒体(prion)的敏感性与细胞型朊蛋白(PrPc)的表达量密切相关，表达量越高，对朊毒体越敏感。拥有高效表达PrPc的细胞系对朊毒体生物学研究具有十分重要的意义。为获得这种对朊毒体敏感的细胞模型，本研究以Neuro-2a细胞为基础，利用pCDNA3.1(-)真核表达载体，携带PrP/GFP融合基因，转染至Neuro-2a细胞。经荧光和抗性的双重连续筛选，获得了稳定、高效表达PrPc的细胞系。
根据已公布的小鼠PrP基因以及pEGFP载体的GFP基因序列设计引物，分别以小鼠基因组和pEGFP质粒为模板，PCR扩增PrP和GFP基因。将这两个基因分别克隆到pGEM-T载体中，获得pGEM-mPrP和pGEM-GFP两个重组质粒，进行测序分析。分别用EcoRⅠ和BamHⅠ、BamHⅠ和HindⅢ以及EcoRⅠ和HindⅢ酶切pGEM-mPrP、pGEM-GFP和pCDNA3.1(-)质粒，电泳、切胶回收。将这三个片段共连接，从而获得融合mPrP/GFP基因的真核表达质粒pCDNA3.1(-)-mPG。由于在PrPC-端融合了绿色荧光蛋白(GFP)，使该系统具备了早期筛选的标签。用脂质体Lipofectamine2000将该质粒转染至Neuro-2a神经细胞，用G418抗性筛选、荧光显微镜检测、Western-Blotting检测、PCR检测、连续传代法筛选能够稳定、高效表达PrP/GFP蛋白的细胞株。本实验成功获得了一株高效表达PrP/GFP蛋白的Neuro-2a细胞株(命名为mPGN2a)，为朊毒体的研究提供了较理想的细胞模型。RNA干扰(RNAi)技术能够高效、特异的抑制目的蛋白的表达，因此是一种有利的蛋白功能研究技术。为便于PrP功能研究，本实验初步探索了利用载体表达shRNA的方法干扰PrP表达。
以小鼠PrP编码基因为靶基因，设计针对PrP的干扰片段。在该片段两端添加ApaⅠ和EcoRⅠ粘性末端作为接头，用ApaⅠ和EcoRⅠ酶切载体pSilenceU6-1.0。将干扰片段与载体共连接，构成重组质粒。用脂质体将重组质粒转染至mPGN2a细胞，用荧光显微镜以及Western-Blotting检测实验中所用的目的片段是否具有干扰效果。虽然最终结果显示，本研究所用的目的片段并没有能够显著抑制PrP的表达，但本尝试为今后使用载体表达法干扰PrP表达技术的研究，提供了有益的参考。