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TRAF家族蛋白在植物生长发育以及抵抗非生物胁迫中起着重要作用。我们研究发现,拟南芥TRAF-like家族蛋白SINA2参与了ABA相关的干旱信号的响应。SINA2的表达受到ABA和干旱的强烈诱导。SINA2蛋白主要定位于细胞质和细胞核。研究还发现,SINA2基因功能缺失突变体sina2对干旱过度敏感;而过表达SINA2的转基因株系能通过增加气孔关闭和减少水分散失提高其抗旱性。另外,用ABA处理sina2突变体和过量表达株系后发现,一些对ABA和干旱响应的基因在突变体中下调,而在过量表达株系中上调。在ABA合成缺陷突变体中,ABA处理能诱导SINA2的表达,但是干旱处理却不能诱导SINA2的表达。因此,干旱诱导SINA2的表达是ABA依赖性的。通过将ABRE(ABA-responsive element)元件结合蛋白AREB1,AREB2,ABF3和ProSINA2∷LUC在拟南芥原生质体中共转化发现,这三个转录因子都可以直接诱导SINA2的表达。因此,SINA2可能是一个介导干旱和ABA信号的正向调控因子。 TLP(Tubby-like)家族蛋白的典型特征是在其C端存在一个Tubby结构域,这个结构域的存在对其定位于细胞质膜上是必需的。植物中的TLP蛋白除了位于C端的Tubby结构域外,在其N端还存在一个F-box结构域。一般认为,F-box蛋白能通过与特定的ASKs蛋白相互作用,形成有功能的SCF类型的E3泛素连接酶来介导底物的降解。启动子融合GUS报告基因和GFP融合蛋白两种方法被用来对拟南芥TLP(AtTLPs)基因的组织表达特征和AtTLPs蛋白的亚细胞定位进行了细致研究。通过将拟南芥AtTLPs与ASKs共同转化到酵母中,进行酵母双杂交实验发现,AtTLP2,AtTLP5和AtTLP8不能与任何一个ASKs蛋白相互作用,不具有E3泛素连接酶功能;而AtTLP1,AtTLP3,AtTLP6,AtTLP7,AtTLP9,AtTLP10和AtTLP11则能与特定的ASKs相互作用,可形成有功能的E3泛素连接酶。对AtTLP3的精细研究发现,AtTLP3是一个能结合特定PIP2并能定位到细胞质膜上的蛋白,且在ABA和渗透胁迫介导的种子萌发中AtTLP3和AtTLP9存在冗余性。 以AtTLP11作为诱饵蛋白,通过酵母双杂交实验筛选拟南芥文库得到了一个NHL(NDR1/HIN1-like)家族基因NHL6。NHL6在未萌发的种子中表达量很高。尽管NHL6在幼苗期的表达量很低,但是该基因受到ABA和多种逆境的诱导上调。与野生型相比,nhl6突变体种子萌发时对ABA不敏感;而过量表达HL6的转基因株系种子萌发时不仅对ABA过敏感,对高盐和高渗透胁迫也更加敏感。进一步的研究表明,过量表达株系的过敏感性是由ABA信号感受发生改变和非生物胁迫下ABA的过量积累造成的。高盐处理还导致过量表达株系中ABA合成基因的上调。酵母双杂交实验表明,NHL6的N端能够特异的与拟南芥Tubby家族蛋白AtTLP11相互作用,且NHL6能与AtTLP11能共定位到细胞质膜上。这些结果表明,NHL6在ABA信号的感受和ABA的生物合成过程中发挥着重要作用;NHL6可能是通过与AtTLP11的相互作用实现其功能的。