【摘 要】
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前言 糖尿病肾病（Diabetic Nephropathy,DN）是糖尿病（Diabetes Mellitus,DM）的主要微血管并发症之一,是DM致残和高死亡率的重要原因。DM时高糖血症除可直接影响组织细胞的正常
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前言 糖尿病肾病（Diabetic Nephropathy,DN）是糖尿病（Diabetes Mellitus,DM）的主要微血管并发症之一,是DM致残和高死亡率的重要原因。DM时高糖血症除可直接影响组织细胞的正常代谢以外,还可以通过非酶化反应与蛋白质、脂质及核酸形成大量的晚期糖基化终末产物（Advanced Glycation End-Products,AGEs）,造成机体组织结构和功能的损害。组织纤维化病变中最重要的因子——转化生长因子（TGF-β）和结缔组织生长因子（CTGF）在DN时表达上调及其作用的发挥与AGEs密切相关。研究证实由AGEs介导产生的活性氧（Reactive Oxygen Species,ROS）是AGEs致病的重要中间介导因子。本实验将研究AGEs在培养的肾间质成纤维细胞（NRK-49F）中对TGF-β1和CTGF mRNA表达及ROS产生的影响,并且观察抗氧化剂可否抑制AGEs的致纤维化作用。 实验材料与方法 1.主要试剂与仪器 AlarmarBlue;DMEM培养基;牛血清白蛋白;胎牛血清;N-乙酰半胱氨酸;2’,7’-二乙酰二氯荧光素;UNIQ-10柱式总RNA抽提纯化试剂盒;TaKaRa RNA PCR Kit（AMV）Ver.3.0。超净工作台;二氧化碳恒温培养箱;倒置相差显微镜;全自动酶标仪;流式细胞仪;PTC-100 PCR仪;GDS8000凝胶自动成像仪;荧光分光光度计;超速低温离心机。 2.实验方法 2.1 AGEs-BSA的体外制备 AGEs-BSA按文献方法体外制备,制备好的AGEs-BSA以荧光分光
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