【摘 要】
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目的:本课题组前期研究发现S100A9在胆管癌组织中表达高于癌旁组织,提示其在胆管癌中的异常表达可能参与胆管癌的发生、发展。为明确胆管癌侵袭、转移机制,本实验以胆管癌细胞QBC939作为研究对象,探究S100A9基因在胆管癌细胞中下调、缺失对胆管癌细胞增殖及转移生物学行为的影响。方法:常规培养胆管癌细胞QBC939,利用实时荧光核酸扩增检测系(qPCR,Real-time Quantitative
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目的:本课题组前期研究发现S100A9在胆管癌组织中表达高于癌旁组织,提示其在胆管癌中的异常表达可能参与胆管癌的发生、发展。为明确胆管癌侵袭、转移机制,本实验以胆管癌细胞QBC939作为研究对象,探究S100A9基因在胆管癌细胞中下调、缺失对胆管癌细胞增殖及转移生物学行为的影响。方法:常规培养胆管癌细胞QBC939,利用实时荧光核酸扩增检测系(qPCR,Real-time Quantitative PCR Detecting System)方法检测S100A9基因在胆管癌细胞的表达情况。将包装含有S100A9基因RNA干扰靶点序列及空载对照慢病毒分别转染胆管癌QBC939细胞,倒置显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况,评估病毒感染率,通过实时荧光核酸扩增检测系方法检测S100A9基因在胆管癌QBC939细胞中的表达情况。采用MTT法检测干扰S100A9表达后胆管癌细胞QBC939的增殖情况,Transwell、划痕实验检测胆管癌细胞QBC939的侵袭能力。结果:⒈与正常胆管细胞比较,S100A9基因在胆管癌细胞QBC939中表达水平较高。⒉胆管癌QBC939细胞转染S100A9-shRNA慢病毒后,S100A9在mRNA水平的表达量受到抑制,干扰效率达到90.9%。⒊Transwell、划痕实验检测发现高表达S100A9的胆管癌细胞QBC939侵袭、转移能力弱。⒋MTT实验结果显示:与对照组相比,转染S100A9-shRNA慢病毒载体的胆管癌QBC939细胞生长速度无明显降低。结论:⒈胆管癌细胞QBC939中S100A9表达升高,与胆管癌的发生有一定的关系,高表达S100A9的胆管癌细胞QBC939侵袭、转移力弱;⒉干扰S100A9基因未能限制胆管癌细胞QBC939的增殖。
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