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背景:乳腺癌(Breast Cancer)是全世界女性最常见的恶性肿瘤,严重威胁女性生命健康及生活质量。乳腺癌转移是致死的首要原因,其发生、发展是多基因、多步骤综合作用的结果。尽管大部分早期乳腺癌患者经个体化及综合治疗后,能获得较好的无病生存期和总生存期,但部分患者仍因化学治疗疗耐药、激素受体表达阴性及缺乏特异性的治疗靶点等原因出现短期复发和远处转移,最终导致患者死亡。因此,探寻乳腺癌增殖、转移的相关机制尤为重要。高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)是一种非组蛋白染色质结合蛋白,作为促生长因子和炎性细胞因子,参与多种肿瘤的发生、浸润和转移等恶性生物学过程。HMGB1可以通过活化核转录因子(NF-κB)促进免疫细胞迁移,而NF-κB作为抗凋亡因子,在其家族中,绝大部分为NF-κB p65,肿瘤浸润转移的生物学行为与NF-κB激活基质金属蛋白酶(MMP)因子相关。因此,探寻HMGB1与NF-κB及MMP-9在肿瘤增殖、转移中的关系成为本实验的焦点。目的:探讨外源性的HMGB1对乳腺癌细胞增殖、迁移及侵袭等恶性生物学行为的作用并探讨可能的机制,为将来制定乳腺癌新的治疗策略提供新方向。方法:1.采用MTT方法检测不同浓度梯度的外源性HMGB1(100-800ng/ml)对乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖的影响。2.运用细胞迁移和侵袭试验评估外源性的HMGB1(400ng/ml)对乳腺癌细胞株MDA-MB-231迁移、侵袭的作用。3.运用RT-PCR方法检测不同浓度梯度的外源性HMGB1(100-800ng/ml)处理后乳腺癌细胞株MDA-MB-231中P65、MMP-9在基因水平的表达情况。4.运用Western-blot方法检测不同浓度梯度的外源性HMGB1(100-800ng/ml)处理后乳腺癌细胞株MDA-MB-231中P65、MMP-9在蛋白水平的表达情况。结果:1.MTT结果显示:与对照组相比,不同剂量组HMGB1刺激乳腺癌细胞株MDA-MB-231后,对MDA-MB-231细胞有明显的增殖作用,各组间差异有统计学意义(P<0.05);当浓度从100ng/ml增加至400ng/ml时,不同浓度组间也存在差异(P<0.05),而400ng/ml组与800ng/ml组间无明显差异(P>0.05)。2.细胞迁移试验结果显示:与对照组相比,经400ng/ml HMGB1作用后的MDA-MB-231细胞迁移数增加到2.17倍(±0.21)(P<0.05)。细胞侵袭试验显示:与对照组相比,经400ng/ml HMGB1作用36h后的MDA-MB-231细胞穿过基质胶的数量增加到2.58倍(±0.13)(P<0.05)。3.PT-PCR检测结果显示:(1)相对于对照组,经不同浓度HMGB1处理MDA-MB-231细胞后NF-κB p65的m RNA表达无明显差异(P>0.05),且各个处理组间p65的m RNA表达亦无明显差异(P>0.05)。(2)不同浓度HMGB1处理MDA-MB-231细胞后MMP-9的m RNA表达均高于对照组(P<0.05),且各个处理组间MMP-9的m RNA表达比值两两比较差别均有统计学意义(P<0.05)。4.Western-blot检测结果显示:(1)HMGB1处理组的p65的蛋白表达量均明显高于对照组(P<0.05),而在处理组的组间比较方面,100ng/ml组和200ng/ml组间的p65表达无明显差异(P>0.05);400ng/ml组和800ng/ml组间的p65表达亦无明显差异(P>0.05)。(2)HMGB1处理组的MMP-9的蛋白表达量均明显高于对照组(P<0.05),且MMP-9各个处理组间比值两两比较差别均有统计学意义(P<0.05),结论:外源性的HMGB1可以促进乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭,可能与NF-κB信号通路激活有关。