蛹虫草子实体多糖提取工艺优化与组分分离鉴定

来源 :山西农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:samzy
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蛹虫草,一种用于食物和医药的珍贵真菌。由于它与冬虫夏草的代表性药理成分相似,因此已成为了冬虫夏草的良好替代品。蛹虫草多糖是蛹虫草中的主要活性物质,具有广泛的生理活性和药用价值,近年来,关于多糖构效与生物活性关系的研究已成为了学者们研究的重点之一。然而目前对蛹虫草子实体多糖整个体系的研究还不成熟,高效提取工艺及其组分尚不明确。为此,本研究采用响应面的方法来优化蛹虫草子实体多糖的热水浸提工艺参数,并对最优工艺提取的多糖进行体外抗氧化研究。同时,将获得的蛹虫草多糖进行进一步的分离纯化,并对其主要组分CP0-A与CP1-A进行了相应的结构鉴定研究。主要结论如下:(1)以蛹虫草子实体为研究对象,在单因素的基础上,通过响应面分析研究热水浸提蛹虫草子实体多糖工艺优化条件,得出最佳工艺条件为:浸提温度80°C,浸提取时间3.1 h,料液比41:1 mL/g,浸提次数2次,此条件下多糖实际得率为6.3328%。关于抗氧化性,来自蛹虫草子实体的多糖具有很强的DPPH自由基清除力(88.9%),与阳性对照的清除率相近,其还原力(1.133)也较强,而羟自由基清除率(53.8%)和总抗氧化性(0.807)相对较低。(2)通过热水浸提得到的粗多糖需进行进一步的纯化和组分分离得到较纯的多糖组分,使用DEAE-cellulose-52阴离子交换柱和Sephacryl S-400丙烯葡聚糖凝胶柱对热水浸提的蛹虫草子实体粗多糖进行组分分离,最终得到CP0-A、CP0-B、CP1-A和CP1-B四个多糖组分。(3)结构鉴定结果:CP0-A与CP1-A两个蛹虫草多糖的主要组分的单糖组成相似度较高,都是α-L-鼠李糖,β-1,3-D葡萄糖,α-半乳糖,及少量甘露糖组成,其摩尔比分别为15.95∶4.26∶9.60∶1.22和19.44∶4.82∶8.73∶0.30;CP0-A的Mn为3.057×10~4 Da,Mw为4.923×10~4 Da,样品构象为柔性无规线团结构,支化程度不高;CP1-A Mn和Mw分别为1.341×10~4 Da和2.234×10~4 Da,构象结果与CP0-A相同(数据不同);CP0-A和CP1-A两个多糖的的形貌存在一定的差异,CP0-A表面较为紧密、粗糙,结构规则不强,CP1-A表面较为光滑,有一定的柔顺性。这一研究结果将会为后续继续开展蛹虫草子实体多糖的生物活性与结构效应的关系、免疫作用机制及药物开发等研究提供参考依据。
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