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前言肺癌是全球发病率最高,对人类健康和生命危害最严重的恶性肿瘤之一。近年来,全球肺癌发病率呈逐年上升的趋势,特别在女性中更为明显。目前已经公认吸烟是肺癌的主要危险因素,而在我国女性吸烟率很低,女性肺癌的发病率却呈逐年增高的趋势。女性肺癌病例中以非吸烟者占多数,吸烟对女性肺癌人群归因危险度仅为20%,提示有吸烟以外的其他危险因素在女性肺癌的发生中起重要作用。人乳头瘤病毒HPV是一种DNA病毒,感染人和动物的皮肤或粘膜可引起增殖性损伤。已有研究表明HPV感染与泌尿生殖道、食管、头颈部、呼吸道等多个部位的肿瘤发生有关。随着分子生物学相关技术的发展,不断有从肺癌组织中检出HPV DNA相关序列的文献报道,提示HPV感染可能与肺癌的发生有关,但HPV致肺癌发生的机制目前仍不清楚。脆性组氨酸三联体基因FHIT是一个重要的抑癌基因。该基因定位于染色体3p14.2上,占据1Mb大小的位置,覆盖FRA3B脆性位点、肾细胞癌相关性断裂点t(3;8)、抑癌基因γ蛋白质酪氨酸磷酸酶基因PTPRG的5′末端及HPV 16整合位点,并含有编码组氨酸三联体的功能。有研究表明,在HPV感染相关的肿瘤中,FHIT基因易发生杂合子丢失和mRNA水平上的表达缺失,因此有学者认为HPV病毒DNA的插入对于FHIT基因的缺失有重要的影响,提示FHIT基因的缺失可能是HPV感染导致肿瘤发生的重要机制之一。本研究应用高灵敏度的PCR技术检测非吸烟女性肺癌组织及对照组织中的HPV DNA序列,巢式RT-PCR法检测FHIT基因mRNA在组织中的表达,探讨HPV感染、FHIT基因缺失与非吸烟女性肺癌发生的相关性,HPV感染对FHIT基因缺失的影响以及HPV感染与FHIT基因缺失对非吸烟女性肺癌影响的交互作用。材料与方法肺癌组织标本取自辽宁省肿瘤医院和中国医科大学附属第一医院入院的非吸烟女性原发性肺癌患者,所有病例术前均未接受化学治疗及放射治疗,经病理学诊断为肺癌,实际收集有效病例60例,其中腺癌37例,鳞癌23例。对照为非吸烟女性,按年龄(±5岁)与病例频数匹配,标本为肺部良性病变(气胸14例,支气管扩张29例,肺结核球17例)病理标本,标本收集分类标记后-80℃深冻保存。同时收集病例及对照的个人一般状况,生活条件,方式与习惯,饮食习惯与种类,个人既往疾病史,家族疾病及癌症史,精神心理因素等。TRIzol试剂提取组织RNA及DNA,PCR扩增HPV相对保守的L1区片段及HPV 16、18型特异片断,同时采用RT-PCR方法检测组织中FHIT基因mRNA水平的表达。建立SPSS 13.0数据库,采用X~2检验和Fisher确切概率法分析HPV感染、FHIT基因缺失与非吸烟女性肺癌危险度,以及肺癌组织中HPV感染与FHIT基因缺失的相关性。叉生法分析HPV感染与FHIT转录本缺失对非吸烟女性肺癌影响的交互作用,计算交互作用超额相对危险度(RERI),交互作用指数(S),归因交互效应百分比(AP),检验标准均为α=0.05。结果HPV通用序列L1、HPV 16、18特异序列在肺癌组织中的检出率分别为31.67%(19/60),20.00%(12/60)和18.33%(11/60),肺癌组与对照组相比HPV 16感染有显著性差异,HPV 16感染的非吸烟女性患肺癌的危险度是未感染者的3.500倍,P＜0.05。FHIT基因mRNA在肺癌组织中表达率为55.00%(33/60),与对照组织相比差异有统计学意义。HPV DNA检出阳性的肺癌组织中FHIT转录本缺失率更高(73.68%),HPV 16感染的女性肺癌患者发生FHIT基因mRNA缺失的危险度是未感染者的5.435倍,P＜0.05。用叉生法分析HPV感染与FHIT转录本缺失之间的交互作用时发现,HPV 16感染与FHIT基因缺失对非吸烟女性肺癌的影响存在正相加模型交互作用,RERI=5.667,P＜0.05。结论1、肺癌组与对照组相比,HPV DNA检出率较高,HPV 16感染是非吸烟女性肺癌的危险因素;2、肺癌组织中FHIT基因转录本缺失频率高于对照组织,HPV 16感染增加了肺癌组织中该基因转录本的缺失频率;3、HPV 16感染与FHIT基因缺失对非吸烟女性肺癌的影响存在正相加模型交互作用。