【摘 要】
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肺是人体的呼吸器官,位于胸腔,主要由上皮、支气管、肺泡等组成,是实现机体与外界环境气体交换,以维持人体生命活动的重要器官。肺发育异常会可导致多种严重的缺陷疾病,如先
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肺是人体的呼吸器官,位于胸腔,主要由上皮、支气管、肺泡等组成,是实现机体与外界环境气体交换,以维持人体生命活动的重要器官。肺发育异常会可导致多种严重的缺陷疾病,如先天性囊性肺疾病、肺发育不良或支气管肺发育不良等,正常的肺发育过程对出生后的生存至关重要。在本课题中,主要探究Isl1是如何调控肺早期发育的分子机理,具体研究Isl1基因在肺上皮中的功能。我们利用Shh Cre小鼠与Isl1flox/flox小鼠交配,获得在肺上皮细胞中条件性敲除的突变体小鼠(Shh Cre;Isl1flox/flox)。研究发现,Isl1突变型小鼠出生致死,P0天HE染色结果显示肺泡无张开。通过免疫组织学方法检测细胞增殖和凋亡情况发现,Isl1突变型小鼠从E16.5天开始肺部细胞增殖异常升高,而细胞凋亡无差异。利用RNA-Seq测序筛选出Isl1可能的靶分子,并通过原位杂交实验进一步验证差异表达基因,P0天突变型小鼠中AT2和AT1型上皮细胞标记基因SLC34A2、SPC及AQP5表达显著下降,Notch的配体Dlk1的表达也受到抑制,近端祖细胞的标记基因Sox2的表达同样显著下降。综上所述,Isl1的敲除导致肺发育缺陷,上皮细胞的分化过程可能受到抑制,具体的分子机理需要进一步的研究。
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