骨髓来源的纤维细胞在特发性肺纤维化中募集及相关信号的研究

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背景和目的特发性肺纤维化(Idiopathic Pulmonary Fibrosis, IPF)是特发性间质性肺炎(Idiopathic Interstitial Pneumonias,ⅡPs)中最常见的一种类型,近年来发病率呈不断上升趋势。目前其发病机制尚不清楚。IPF的病理特征是肺内成纤维细胞(Fibroblast)/肌成纤维细胞(Myofibroblast)数量的扩增与纤维化病灶(Fibroblastic Foci)形成;肺内纤维化病灶主要由肌成纤维细胞组成。国内外研究认为骨髓来源的纤维细胞(Fibrocytes)可能募集到纤维化病灶中并分化为肌成纤维细胞。它们共同表达普通的白细胞抗原CD45、造血干细胞抗原CD34、间充质标记物如胶原-1(Collagen-Ⅰ)、纤维结合素(Fibronectin)、α-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)、脯氨酰-4-羟化酶(prolyl-4-hydroxylase)等特有的细胞表面标记物。大部分Fibrocytes都表达趋化因子受体4(CXCR4),并认为CXCR4/CXCL12信号途径对Fibrocytes的募集十分重要。目前关于其研究都是在体外或实验动物模型中进行的,而在IPF患者中关于Fibrocytes促进了肺纤维化形成的研究还未见相关报道。本次实验研究目的:①应用双重免疫荧光方法通过荧光显微镜分别观察实验组和对照组中的Fibrocytes;②通过对各组Fibrocytes数量的比较,在肺纤维化形成过程中探讨CXCR4/CXCL12信号途径对Fibrocytes募集的作用。旨在为Fibrocytes促进肺纤维化形成的发病机制提供理论基础;为更好的了解该病的发生发展和转归及靶向治疗提供分子生物学依据。材料与方法实验组20例,标本来自河南省人民医院行小切口开胸肺活检,最终病理证实为IPF的住院患者。对照组20例,标本来自河南省人民医院与河南省胸科医院因支气管扩张症行肺叶切除术的患者,所取肺组织标本距病变距离大于5cm,经病理证实为正常的肺组织。根据Fibrocytes所特有的不同的细胞表面标记物,按不同组合分成四组:①CXCR4/Collagen-Ⅰ,②CD34/a-SMA,③CD34/Collagen-Ⅰ,④CD45RO/Collagen-Ⅰ。通过荧光显微镜分别观察实验组和对照组中Fibrocytes,分别计数四组中Fibrocytes数百分率,结果采用SPSS12.0统计分析软件处理,各组数据之间的比较分析分别采用Kruskal-Wallis test及Mann-Whitney u,以a=0.05为检验水准。结果1.双重免疫荧光试验结果:实验组20例IPF患者中有19例肺组织发现Fibrocytes,而对照组中没有发现。2.相关结果分析:本实验研究经统计学检测发现:通过荧光显微镜观察并分别计数IPF患者肺组织中上述四组的Fibrocytes数百分率,分别为(5.19±0.0152%)、(2.19±0.0083%)、(2.56±0.0109%)、(2.29±0.0082%)。①组分别与②组、③组、④组的数据比较差异具有统计学意义(P<0.001)。结论1.该实验研究发现在实验组肺组织存在Fibrocytes,而在对照组中则未发现。提示Fibrocytes在IPF的形成和发展过程中可能促进了肺纤维化形成。2.该实验研究发现在人类间质性肺疾病中亦可能存在Fibrocytes。3.该实验研究发现在实验组肺组织能检测更多CXCR4+的Fibrocytes,提示CXCR4+的Fibrocytes可能通过CXCR4/CXCL12信号途径募集IPF患者肺组织并促进了肺纤维化形成。
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