【摘 要】
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目的:1.体外建立人食管癌顺铂耐药细胞株TE-1/CDDP,并观察顺铂耐药对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。2.对我院近五年来胃镜检出的食管疾病进行回顾性分析,包括各种食管疾病的检出率及构成比,各种食管疾病的年龄及性别分布情况,食管癌的病理类型及发病部位分布情况,以反映本地区食管疾病的发病特点。方法:1.采用药物浓度梯度递增法,构建食管癌顺铂耐药细胞株TE-1/CDDP,显微镜下观察细胞的形
【基金项目】
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2021年广东省自然科学基金项目,“m6A修饰介导的 circ0006168 上调促进食管鳞癌顺铂耐药的机制研究”,No.2021A1515012127,主持人吴灵飞教授;
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目的:1.体外建立人食管癌顺铂耐药细胞株TE-1/CDDP,并观察顺铂耐药对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。2.对我院近五年来胃镜检出的食管疾病进行回顾性分析,包括各种食管疾病的检出率及构成比,各种食管疾病的年龄及性别分布情况,食管癌的病理类型及发病部位分布情况,以反映本地区食管疾病的发病特点。方法:1.采用药物浓度梯度递增法,构建食管癌顺铂耐药细胞株TE-1/CDDP,显微镜下观察细胞的形态学变化。CCK8实验检测不同浓度顺铂对TE-1及TE-1/CDDP细胞的增殖抑制作用,并计算IC50值以及耐药指数。2.绘制TE-1及TE-1/CDDP细胞生长曲线并计算细胞倍增时间。克隆形成实验检测细胞增殖能力。划痕愈合实验检测细胞迁移能力。Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。3.收集2017-2021年在我院内镜中心进行胃镜检查的病例。筛选出有食管疾病的病例,计算各食管疾病的检出率和构成比。各种食管疾病的年龄和性别、食管癌的病理类型和发病部位在系统上查询。结果:1.历时1年成功构建了食管癌耐药细胞株TE-1/CDDP。显微镜下观察发现,TE-1细胞大致呈圆形,形态较规则,大小均一。用顺铂诱导后,细胞停止生长,部分细胞死亡漂浮,培养液浑浊。残存的贴壁细胞形态变得不规则,胞质内黑色颗粒增多,突起形成增多,形状变得狭长。CCK8实验结果表明,与TE-1细胞相比,顺铂对TE-1/CDDP细胞的增殖抑制作用明显减弱。TE-1细胞的IC50值为4.17umol/L,而TE-1/CDDP细胞的IC50值为13.77umol/L,耐药指数为3.3。2.TE-1/CDDP细胞倍增时间较TE-1细胞延长,表明TE-1/CDDP细胞增殖能力较TE-1细胞明显减弱。克隆形成实验结果表明,TE-1/CDDP细胞的克隆形成能力较TE-1细胞明显下降。划痕愈合实验结果表明,TE-1/CDDP细胞的迁移能力较TE-1细胞明显增强。Transwell实验结果表明,TE-1/CDDP细胞的迁移及侵袭能力强于TE-1细胞。3.近五年在汕头大学医学院第二附属医院内镜中心行胃镜检查总共48523例,检出食管疾病8599例,总检出率为17.72%。其中,食管炎检出率最高,共4683例(9.65%),其次为食管癌907例(1.87%)。不同年龄阶段食管疾病检出例数及检出率分别为:<40岁1585例(11.12%),40-59岁4006例(17.98%),≥60岁3008例(25.09%)。不同性别各食管疾病检出例数及检出率分别为:男性6218例(22.47%),女性2381例(11.42%)。在检出的907例食管癌中,不同病理类型例数及构成比分别为:鳞癌712例(78.50%),腺癌110例(12.13%),其他少见类型癌13例(1.43%),未明确类型癌73例(8.05%)。在检出的907例食管癌中,发病部位最常累及食管下段,总共369例(40.68%),其次依次是累及中段160例(17.64%)、累及中下段159例(17.53%)、累及上段133例(14.66%)、累及上中段70例(7.72%)、累及全段16例(1.76%)。结论:1.成功构建了食管癌顺铂耐药细胞株TE-1/CDDP,功能实验结果表明,与TE-1细胞相比,TE-1/CDDP细胞的增殖能力明显下降,而迁移、侵袭能力增强。2.食管疾病总检出率为17.72%,其中,检出率最高的是食管炎,其次是食管癌。随着年龄增大,食管疾病总体检出率升高,食管疾病高发年龄段为≥40岁。食管疾病总体检出率男性高于女性,绝大部分食管疾病检出率男性高于女性。近五年检出的食管癌中,鳞状细胞癌是最主要的病理类型,其次为腺癌。食管癌最常累及的部位是食管下段,其次为中段。
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