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目的:原发性膜性肾病(IMN)是一种常见的慢性肾小球疾病,其形式多表现为蛋白尿或肾病综合征。IMN存在自然緩解与不断恶化两种转归,有观察蛋白尿越多预后越差,约25%-40%的IMN经5-30年最终进展至终末期肾病(ESRD),因此IMN蛋白尿的形成原理与干预研究一直受到人们的高度重视。近年来,研究者认为足细胞蛋白的变化与肾小球滤过膜的通透性有关,因为足细胞蛋白的变化与蛋白尿水平相关。足细胞蛋白包括足细胞的固有蛋白,细胞骨架蛋白以及足细胞合成分泌的功能性蛋白,但足细胞表达的各种蛋白、及其作用、以及与IMN蛋白尿的关系尚未完全阐明。骨形态发生蛋白-7(Bone Morphogenetic Protein-7,BMP-7),也称为成骨蛋白-1(Osteogenic Protein-1,OP-1),是TGF超家族成员骨形态发生蛋白(Bone Morphogenetic Proteins,BMPs)中的一种,是一种多效性细胞因子,主要存在于人类的肾脏中,与肾脏的发育、肾功能的维持密切相关,是肾脏的保护因子。但足细胞BMP-7与IMN肾小球滤过膜的形态改变、滤过功能变化、和蛋白尿之间的关系尚未研究。结缔组织生长因子(Connective Tissue Growth Factor,CTGF)是一种富含半胱氨酸、分子量为36-38kD的分泌性多肽,属即刻早期基因CCN基因家族蛋白成员之一,是TGF-β致纤维化的下游分子,广泛存在于人体多种组织器官中,包括心、脑、肾、肺、胎盘、胰腺和结缔组织等,在肾脏中含量最高,也在肾小球足细胞中表达。足细胞CTGF与IMN的关系不明。本研究旨在利用免疫组化的方法重点了解BMP-7和CTGF在原发性膜性肾病肾小球内的表达变化及其与蛋白尿、血肌酐等指标的关系,探讨BMP-7和CTGF对原发性膜性肾病患者的影响。方法:(1) IMN组病例来源于2008年1月至2008年12月在河北医科大学第二医院肾内科病房住院诊治并经临床和病理确诊的32例IMN患者,在依据其病理分期进一步分为Ⅰ期IMN组(25例)、Ⅱ期+ⅢIMN组(其中Ⅱ期IMN 6例,Ⅲ期IMN 1例)两组。(2)对照组病例来源于河北医科大学第二医院泌尿外科6例因肾脏肿瘤切除一侧肿瘤肾后经病理证实为肾脏良性肿瘤的患者。(3)采用免疫组织化学方法分别检测Ⅰ期IMN组、Ⅱ期+Ⅲ期IMN组患者与对照组患者肾小球BMP-7和CTGF的表达变化(4)测定各组24小时尿蛋白定量、血肌酐的水平。(5)临床指标及实验数据以x±S表示,BMP-7、CTGF在对照组、Ⅰ期IMN组、Ⅱ+III期IMN组表达的关系组间采用单因素方差分析,进一步各组间两两比较采用SNK-q检验。BMP-7、CTGF分别与24h尿蛋白定量,血肌酐间的相关性采用直线相关分析。(6)采用SPSS13.0统计软件处理数据,以p<0.05表示差异有统计学意义。结果:1临床实验指标:1.1 32例IMN患者,平均年龄(47.74±11.64)岁,与正常对照组患者平均年龄(50.60±10.12)岁比较,在年龄构成上无统计学差异(p>0.05)。1.2正常对照组患者的24小时尿蛋白定量、血肌酐分别为:(0.05±0.03)g/24h、(63.74±8.95)μmol/L;Ⅰ期IMN组、Ⅱ+Ⅲ期IMN组、Ⅰ-Ⅲ期IMN组24小时尿蛋白定量分别为:(4.29±2.23)g/24h、(5.12±2.16)g/24h、(4.56±2.26)g/24h;Ⅰ期IMN组、Ⅱ+Ⅲ期IMN组、Ⅰ-Ⅲ期IMN组血肌酐分别为:(72.02±11.87)μmol/L、(76.30±6.50)μmol/L、(72.85±11.08)μmol/L。IMN组24小时尿蛋白定量明显高于对照组(p<0.01)。2免疫组织化学结果:2.1 BMP-7在对照组、IMN组肾小球足细胞、近曲小管、集合小管均有表达;在IMN组、Ⅰ期IMN组、Ⅱ+Ⅲ期IMN组及对照组肾小球表达的阳性面积比值分别为:(18.46±8.25)%、(25.98±3.93)%、(12.56±4.89)%、(30.15±4.19)%。BMP-7在IMN组、Ⅰ期IMN组、Ⅱ+Ⅲ期IMN组肾小球内的表达均较对照组显著减少(p<0.01,p<0.05,p<0.01);BMP-7在Ⅱ+Ⅲ期IMN组肾小球内的表达较Ⅰ期IMN组显著减弱(p<0.01)。2.2 CTGF在对照组、IMN组肾小球足细胞、内皮细胞、系膜细胞及肾小管上皮细胞均有表达;在IMN组、Ⅰ期IMN组、Ⅱ+Ⅲ期IMN组及对照组肾小球表达的阳性面积比值分别为:(26.57±10.56)%、(20.49±6.78)%、(32.49±8.75)%、(15.10±3.30)%。CTGF在IMN组、Ⅰ期IMN组、Ⅱ+Ⅲ期IMN组肾小球内的表达均较对照组明显增加(p均<0.01);CTGF在Ⅱ+Ⅲ期IMN组肾小球内的表达较Ⅰ期IMN组显著增加(p<0.01)。2.3 IMN组肾小球内BMP-7的表达与CTGF的表达呈负相关关系(r=-0.698, p=0.001)。2.4 IMN组肾小球内BMP-7的表达与24小时尿蛋白定量呈负相关关系(r=-0.751, p=0.001),而与血白蛋白、血肌酐、血脂、免疫球蛋白IgG及血尿酸无明显相关性。2.5 IMN组肾小球内CTGF的表达与24小时尿蛋白定量呈正相关关系(r=0.605, p=0.001),与血白蛋白、血肌酐、血脂、免疫球蛋白IgG及血尿酸无明显相关性。结论:1肾小球内BMP-7主要表达于足细胞。BMP-7在各IMN组肾小球内的表达均较正常对照组显著减少,且BMP-7在IMN组肾小球内的表达与24小时尿蛋白定量呈负相关关系,即随着IMN的病理类型加重,BMP-7在肾小球中的表达逐步减少,尿蛋白逐步增加,提示BMP-7是肾脏的保护因子。2肾小球内CTGF非特异性地表达于足细胞。CTGF在IMN组肾小球内的表达较正常对照组显著增加,且CTGF在IMN组肾小球内的表达与24小时尿蛋白定量呈正相关关系。提示IMN肾小球内CTGF的表达增加与蛋白尿的形成有关。