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猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是造成目前养猪业严重经济损失的重要疾病之一。其病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory virus, PRRSV),该病毒在临床上引起母猪流产、早产、死胎、断奶仔猪肺炎,生长迟缓及其他病原的继发感染。鉴于目前尚缺乏河南省在本病流行病学及病原学等方面的系统的研究资料,本研究调查了该病在河南的流行状况,对其三间分布及其影响传播的因素进行了较为系统的研究,探究了PRRSV的变异规律。本研究结果无疑将为河南省制定该病的防控规划提供重要的参考依据。本文通过设计外侧引物P1、P2,扩增大小约402bp的片段,内侧引物P3、P4,扩增大小约176bp的片段,拟建立检测PRRSV的套式PCR方法;并应用该方法对PRRSV MLV株、猪伪狂犬病病毒(PRV)、圆环病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)、猪瘟病毒(CSFV)及空白对照进行检测。结果显示,除PRRSV MLV外,猪伪狂犬病病毒(PRV)、圆环病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)、猪瘟病毒(CSFV)及空白对照的检测结果均为阴性;将250μL细胞培养的PRRSV MLV病毒提取RNA后,依次稀释成10-1~10-4,均能扩增出明显的目的条带;且多次重复能得到一致的结果。表明本研究建立的套式PCR方法具有特异性强、敏感性高、重现性好的优点。对河南189个县(市)进行了PRRS的流行病学问卷调查。结果显示,PRRSV免疫猪场占38%; PRRS多发生在春、冬两季及每年的7、8月份;发病猪群养殖类型主要为小规模养殖场及散养户;发病猪的年龄主要为30~70日龄,约占41%,其次为2~30日龄,占39%,怀孕母猪占17%,其他占3%;临床症状表现母猪繁殖障碍的占30%,表现仔猪呼吸道症状的占50%,母猪繁殖障碍-仔猪呼吸道症状的占30%,其他临床表现的占10%。对河南20个县市163家猪场的送检样品采用本研究建立的套式PCR进行PRRSV检测。结果显示,其中18个县市检出PRRSV阳性,阳性检出率为12.5%~100%,平均阳性率为34.4%。表明PRRS已成为危害当地养猪业的重要疫病。通过对来自河南、福建、山东、浙江等不同省份的29株分离株采用PCR测序、DNAstar软件进行同源性分析,并与VR-2332、LV、BJ-4、CH-1a、HB-1、WSV等参考型株比较。结果显示,河南本省PRRSV ORF5基因序列间的同源性为95.0%~100%;与VR-2332、LV、BJ-4、CH-1a、HB-1、WSV等参考型株的同源性为88.9%~90.2%、63.3%~64.2%、88.1%~89.4%、95%~96%、96.4%~97.2%、89.1%~90.9%;与福建、山东和浙江样品同源性分别为88.1%~98.3%、96.2%~99.2%和95.7~99.0%。不同地域PRRSV