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目的:间质干细胞(MSC)的可塑性使其成为细胞治疗和基因治疗的理想种子细胞,已广泛应用于多种损伤修复中。但MSC移植安全性不可忽视,其可能突变致瘤或作为肿瘤微环境细胞,参与肿瘤的发生发展。MSC也可能与其他细胞发生融合,本实验旨在探讨间质干细胞与胃癌细胞的融合及融合细胞的生物学特性,为MSC的应用安全性及在胃癌发生发展中的作用提供实验依据。 方法:体外以PEG1500诱导脐带间质干细胞与胃癌细胞株(SGC-7901或HGC-27)发生细胞融合,通过流式细胞仪分选融合细胞。经倒置显微镜及流式成像系统鉴定细胞融合现象及融合细胞与亲本细胞之间细胞形态的改变。通过有限稀释法对分选后的细胞进行单克隆培养获得两株融合细胞,分别为HGC-27来源的的融合细胞HGC-27 fusion与SGC-7901来源的融合细胞SGC-7901 fusion。细胞计数与克隆形成实验评价融合细胞生长增殖能力。Transwell迁移实验与划痕实验比较融合细胞与亲本胃癌细胞的迁移能力。免疫荧光与Western blot检测上皮与间质相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin及α-SMA的表达。荧光定量RT-PCR方法检测融合细胞与亲本胃癌细胞间EMT相关因子与干性基因的表达。流式细胞术与免疫荧光的方法检测融合细胞与亲本胃癌细胞CD44与CD133的表达。裸鼠皮下成瘤实验评价融合细胞的致瘤能力。免疫组化分析融合细胞组与亲本胃癌细胞组肿瘤组织PCNA及VEGF的表达。 结果:体外流式分选得到两种不同胃癌细胞株(HGC-27、SGC-7901)与脐带间质干细胞的融合细胞。荧光显微镜能够观察到双色双核的融合细胞。与脐带间质干细胞融合后,胃癌细胞失去上皮细胞形态,呈纤维状。细胞计数与克隆形成实验结果表明融合细胞增殖能力增强,克隆形成数目比亲本胃癌细胞高3-4倍。融合细胞PCNA与CyclinD1蛋白表达水平也增高。Western blot与免疫荧光结果显示融合细胞E-cadherin表达下调,α-SMA、vimentin、N-cadherin表达上调。荧光定量RT-PCR结果同样显示在mRNA水平,融合细胞E-cadherin表达水平下调,α-SMA、FAP、vimentin、N-cadherin、snail、slug、twist表达水平明显上调。免疫荧光结果表明,融合细胞CD44表达比亲本胃癌细胞增强。流式检测CD133表达,两种胃癌细胞来源的融合细胞均比其亲本细胞表达增高。此外,裸鼠成瘤实验结果表明融合细胞体内成瘤能力增强。 结论:实验结果表明脐带间质干细胞能够与胃癌细胞融合,融合细胞迁移能力、干性和增殖能力增强,并有更强的体内致瘤能力。本研究提示胃癌细胞与间质干细胞的融合可能是胃癌恶性发展的潜在机制,为胃癌的诊治提供新思路。