高含量磷脂酰胆碱分离纯化

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大豆卵磷脂是重要的营养物质,包括多种磷脂化合物,其中磷脂酰胆碱(PC)的含量是评价大豆卵磷脂级别的重要指标。高含量的磷脂酰胆碱可以作为药物应用于肝病的预防与治疗。本课题的研究目标是建立高含量磷脂酰胆碱的分离纯化方法。  论文首先研究了磷脂类化合物在正相分离模式下的保留规律,分别开展了正己烷-异丙醇-水以及乙腈-甲醇-水两种流动相体系下硅胶、酰胺以及二醇基三种固定相的筛选。结果表明乙腈-甲醇-水体系分离更为稳定,峰形较好,并且PC与其它磷脂的分离较好。最终选择在酰胺柱上建立磷酯酰胆碱纯化的监测方法。  以大豆卵磷脂粉末为原料,考察乙醇提取的浓度,温度及提取方式,得到大豆卵磷脂乙醇粗提物;再用二醇基填料进行高含量磷脂酰胆碱的纯化。经工艺优化,确认用95%乙醇在30℃下机械搅拌提取大豆卵磷脂;以乙醇作为洗脱溶剂,控制溶剂与柱温40℃,流速0.5 mL/min。在该条件下,当上样量3%时,磷脂酰胆碱的纯度可达91.3%,回收率为80.6%。  磷脂酰胆碱在质谱正离子模式下可产生m/z184的特征离子,在负离子模式下可确认脂肪酸的种类。因此通过质谱表征,可确认所制备的高含量磷脂酰胆碱含有12种磷脂酰胆碱分子,与多烯磷脂酰胆碱胶囊中的磷脂酰胆碱分子种类相同,并且相对比例相似。
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