【摘 要】
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目的:通过向脑卒中大鼠的脑室内注射肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(TWEAK),观察卒中后抑郁大鼠行为学改变,脑组织内炎性因子变化,海马及前额叶皮质的细胞凋亡及血脑屏障通透性的情况,探讨TWEAK与卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)的关系及相关作用机制。方法:采用两步法制作PSD模型,首先建立脑缺血模型,然后脑室内注射TWEAK。将大鼠随机分为假手术组(Con tro
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目的:通过向脑卒中大鼠的脑室内注射肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(TWEAK),观察卒中后抑郁大鼠行为学改变,脑组织内炎性因子变化,海马及前额叶皮质的细胞凋亡及血脑屏障通透性的情况,探讨TWEAK与卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)的关系及相关作用机制。方法:采用两步法制作PSD模型,首先建立脑缺血模型,然后脑室内注射TWEAK。将大鼠随机分为假手术组(Con trol组)、脑卒中组(MCA O组)、同型对照组(MCAO+DMSO组)、PSD组(MCAO+TWEAK组)。采用体重、旷野实验、强迫游泳实验、糖水偏好实验研究大鼠行为学改变;采用RT-PCR检测海马区炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA的表达;TUNEL染色标记前额叶皮质组织细胞凋亡情况;(4)免疫组织化学方法检测前额叶皮质及海马CA1区水通道蛋白-4(AQP-4)表达情况。结果:(1)行为学测试:(1)体重:MCAO术后14天内,各组间体重变化无明显差别,从术后第14天起(脑室内开始注射药物),PSD组体重逐渐下降,其余各组皆有上升趋势。到第32天时,PSD组体重下降最为显著,且与假手术组、卒中组及同型对照组相比均有统计学差异(P<0.05)。PSD组体重自第22天起开始出现统计学意义(P<0.05);第32天与第14、22天相比较,体重明显减轻(P<0.05)。(2)糖水偏好实验:实验结束后的各组对比中,PSD组糖水偏好率最低,与假手术组、同型对照组相比有统计学意义(P<0.05)。(3)旷野实验:从第14天起(脑室内开始注射药物),PSD组不动时间的显著延长;到第32天时差异最为明显,PSD组与假手术组、同型对照组、卒中组相比差异有统计学意义(P<0.05)。PSD组的不动时间在第22天时开始出现统计学意义(P<0.05);第32天与第14、22天相比,不动时间显著延长(P<0.05)。(4)强迫游泳实验:尽管PSD组与假手术组、卒中组、同型对照组相比不动时间有所延长,但统计学无意义(P>0.05)。(2)TUNEL染色结果:大鼠前额叶皮质区:假手术组TUNEL阳性细胞零星散布,颜色较浅,PSD组阳性细胞密集分布,颜色较深;PSD组、同型对照组、卒中组大鼠在前额叶皮质区阳性细胞数与假手术组相比,均有明显升高(P<0.05);PSD组与假手术组、同型对照组、卒中组相比阳性细胞数均有提升(P<0.05)。大鼠海马CA1区:假手术组TUNEL阳性细胞分布稀疏,颜色浅于其余三组,PSD组阳性细胞较同型对照组、卒中组均有提升(P<0.05)。(3)RT-PCR检测结果:PSD组与假手术组、同型对照组、卒中组相比,海马区炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA明显升高(P<0.05)。(4)免疫组化结果:前额叶皮质区:PSD组与假手术组、同型对照组、卒中组前额叶皮质AQP-4蛋白阳性细胞数相比,明显增多,且差异具有统计学意义(P<0.05)。海马CA1区:与假手术组相比,卒中组、同型对照组、PSD组AQP-4蛋白阳性细胞数依次增多,PSD组增多的阳性细胞数与卒中组、同型对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)大鼠脑室内注射TWEAK可以引起卒中后抑郁样行为,为研究卒中后抑郁的炎症机制提供了一种制作模型的新方法。(2)脑室内注射TWEAK可以引起卒中后大鼠的前额叶皮质及海马CA1区细胞凋亡、血脑屏障通透性的改变、及中枢系统促炎因子的表达增加,推测TWEAK/Fn14通路可能是卒中后抑郁的潜在治疗靶点。
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