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目的:通过检测出生前DEHP暴露的成年后大鼠下丘脑昼夜节律调控相关基因Clock、Arntl、Dbp、Per1、Per2的表达水平,以及CLOCK和DBP蛋白在SCN核区和大脑皮质的表达水平,探讨出生前DEHP暴露对成年大鼠昼夜节律基因及其产物的影响。方法:将32只孕鼠随机分为溶剂(玉米油)对照组和2、10、50mg/kg DEHP剂量组,每组8只,从孕14至孕19天,10mL/kg/天进行灌胃染毒。将子代大鼠出生日记为PND0,于PND21断乳并分笼饲养。在子代大鼠10周龄时每窝随机选取雌、雄各1只,每组雌、雄各8只,断头处死,取出脑组织后用脑模具制成1mm厚的切片,在下丘脑包含SCN的区域打孔并提取总RNA,用实时荧光定量PCR检测昼夜节律相关基因在大鼠下丘脑SCN核区的表达水平。用同样的方法选择每组雌、雄大鼠各8只,取出脑组织,用振荡切片机制成40μm厚的脑切片。根据大鼠脑立体定位图谱,挑选含有SCN核区的脑片,用免疫荧光组织化学法结合激光扫描共聚焦显微镜检测CLOCK蛋白和DBP蛋白的表达水平。结果:(1)雄性子代大鼠各组间SCN核区Clock基因表达水平差异无统计学意义(F=0.200,P=0.896)。雌性子代大鼠各组间SCN核区Clock基因表达水平差异有统计学意义(F=5.390,P=0.007),与对照组相比,50mg/kg DEHP剂量组雌性子代大鼠SCN核区Clock基因表达水平上调(P<0.05)。(2)雄性子代大鼠各组间SCN核区Arntl基因表达水平差异无统计学意义(F=0.293,P=0.830)。雌性子代大鼠各组间SCN核区Arntl基因表达水平差异无统计学意义(F=0.688,P=0.569)。(3)雄性子代大鼠各组间SCN核区Dbp基因表达水平差异有统计学意义(F=4.179,P=0.015),与对照组相比,10、50mg/kg DEHP剂量组雄性子代大鼠SCN核区Dbp基因表达水平下调(P<0.05)。雌性子代大鼠各组间SCN核区Dbp基因表达水平差异无统计学意义(F=1.837,P=0.170)。(4)雄性子代大鼠各组间SCN核区Per1基因表达水平差异无统计学意义(F=0.341,P=0.796)。雌性子代大鼠各组间SCN核区Per1基因表达水平差异有统计学意义(F=3.535,P=0.031),与对照组相比,50mg/kg DEHP剂量组雌性子代大鼠SCN核区Per1基因表达水平上调(P<0.05)。(5)雄性子代大鼠各组间SCN核区Per2基因表达水平差异无统计学意义(F=0.673,P=0.576)。雌性子代大鼠各组间SCN核区Per2基因表达水平差异无统计学意义(F=0.688,P=0.569)。(6)雄性子代大鼠各组间SCN核区CLOCK蛋白表达水平差异有统计学意义(F=3.271,P=0.043),与对照组相比,2、50mg/kg DEHP剂量组雄性子代大鼠SCN核区CLOCK蛋白表达水平下调(P<0.05)。雌性子代大鼠各组间SCN核区CLOCK蛋白表达水平差异有统计学意义(F=4.283,P=0.017),与对照组相比,2、50mg/kg DEHP剂量组雌性子代大鼠SCN核区CLOCK蛋白表达水平上调(P<0.05)。(7)雄性子代大鼠各组间皮质CLOCK蛋白表达水平差异无统计学意义(F=0.798,P=0.510)。雌性子代大鼠各组间皮质CLOCK蛋白表达水平差异无统计学意义(F=0.743,P=0.539)。(8)雄性子代大鼠各组间SCN核区DBP蛋白表达水平差异无统计学意义(F=2.199,P=0.121)。雌性子代大鼠各组间SCN核区DBP蛋白表达水平差异无统计学意义(F=2.045,P=0.140)。结论:(1)出生前DEHP暴露可能通过改变部分SCN核区昼夜节律调控相关基因和蛋白的表达水平干扰昼夜节律调控。(2)出生前DEHP暴露对大鼠SCN核区昼夜节律相关基因表达水平的影响可能与暴露水平有关。(3)出生前DEHP暴露对大鼠昼夜节律的干扰作用呈现性别差异。